戊四氮(Pentylenetetrazole,PTZ)是一種高度敏感的化合物,有毒物質(zhì);小心處理。
1.將2 mg/mL PTZ溶解在無菌0.9%(w/v)NaCl中。在使用當天準備PTZ。
2.對于野生型C57BL/6小鼠,試驗建議劑量為30-35 mg/kg。對PTZ的敏感性取決于使用的小鼠品系,注射劑量因?qū)嶒災(zāi)康亩悺?/span>
3.服用PTZ后觀察動物行為30分鐘,并對異常行為進行分類和評分。如果可能,觀察動物24小時,或注射后至少再觀察6-10小時,特別是在癲癇發(fā)作嚴重時得分達到3分或以上。
4.每隔一天注射一次PTZ。注射的次數(shù)取決于實驗的目的。
5.癲癇評分:
0:行為正常,無異常。
1:固定,趴著。
2:頭部點頭、面部、前肢或后肢肌陣攣。
3:持續(xù)的全身肌陣攣,肌陣攣抽搐,尾巴僵硬地舉起。
4:仰臥,強直發(fā)作,側(cè)身跌倒。
5:強直陣攣發(fā)作,仰臥,狂奔跳躍。
6:死亡。
6.癲癇后分析
1) 免疫組化分析。
2) 三箱社交測試。
3) 場景恐懼記憶。
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