ELISA試劑盒實驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在科研領域上得到了廣泛的應用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對實驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。影響ELISA試驗結果必看事項清點:
1、操作應對試驗的物理參數(shù)有充沛的了解,如環(huán)境溫度(保持在18 c~25℃)、反響孵育溫度和孵育時刻、洗刷的次數(shù)等,要先查看水育箱溫度,是否符合要求。
2. 正確運用加樣器加樣器應筆直參加標本或試劑,ELISA試劑盒防止刮擦包被板底部。加樣過程中防止液體外濺,血清殘留在反響孔壁上,加樣器吸頭要清洗干凈,防止污染,加樣次序要與說明書共同,否則可導致成果過錯,試驗重復性差。
3. 手工洗板加洗液時沖擊力不要太大,洗刷次數(shù)不要超越說明書引薦的洗刷次數(shù),洗液在反響孑l內滯留的時刻不宜太長。不要使洗液在孑l間竄流,形成孔問污染,導致假陰性或假陽性。
4. 要保證加液量共同 我們在運用時感覺滴瓶加液不如加樣器好,滴瓶不易控制加液量禁絕,形成顯色不統(tǒng)一,判別過錯。
5. 顯色液量不行過多 加樣的工作環(huán)境不能處于陽光直射的環(huán)境下,加顯色體系后要避光反響,顯色液量不能過多,避免顯色過強。ELISA試劑盒的影響因素應選用有國家批準文號,質量靠得住的產(chǎn)品,不能圖廉價,忽視質量bao證。試劑應妥善保存于4℃冰箱內,在運用時先平衡至室溫,不同批號的試劑組分不宜交叉運用。試劑敞開后要在一周內用完,剩下的試劑下次用時應先查看是否蛻變,顯色劑如被污染變色將形成全部顯色,導致過錯成果。
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