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蛋白質(zhì)是細(xì)胞的重要組成部分，對維持生命活動起著至關(guān)重要的作用。為了進(jìn)一步對蛋白質(zhì)進(jìn)行研究和利用，需要對其進(jìn)行純化，純化是從混合樣品中分離出目標(biāo)蛋白質(zhì)的過程。而蛋白純化填料作為純化過程中*重要組成部分，起著至關(guān)重要的作用，主要是是指用于吸附和分離蛋白質(zhì)的固相填料，通常包括離子交換樹脂、親和層析樹脂、凝膠過濾材料等。其中，離子交換樹脂和親和層析樹脂是目前應(yīng)用廣泛的純化填料。
離子交換樹脂是指具有陰、陽離子交換基團(tuán)的樹脂，可以根據(jù)蛋白質(zhì)表面所帶的電荷性質(zhì)，選擇相應(yīng)的陰、陽離子交換樹脂進(jìn)行選擇性吸附和分離。離子交換樹脂操作簡單、效率高、適用范圍廣，但可能會造成蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)損傷和純化效果不理想等問題。
親和層析樹脂則是根據(jù)蛋白質(zhì)的特異性結(jié)合性，通過選用匹配的親和劑進(jìn)行選擇性吸附和分離。比如，親和層析樹脂可以利用抗體來選擇性吸附和純化所需的蛋白質(zhì)，也可以利用金屬離子和His標(biāo)記來選擇性吸附和純化蛋白質(zhì)。親和層析樹脂具有選擇性強(qiáng)、結(jié)構(gòu)損失小等優(yōu)點，但成本較高。
除此之外，還有凝膠過濾材料，其通過蛋白質(zhì)在凝膠孔洞中的分子大小、形狀等性質(zhì)的差異進(jìn)行選擇性純化。凝膠過濾材料可根據(jù)自身需要進(jìn)行不同孔徑的填充，由于對蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)影響小，因此也被廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)純化中。
蛋白純化填料使用時需注意：
1.定期更換緩沖液：選擇合適的緩沖液和保護(hù)劑，定期更換。
2.定期清洗填料：采用PH調(diào)節(jié)、超聲波、化學(xué)法等方法，去除阻塞物和雜質(zhì)。
3.避免高溫、干燥：避免填料暴曬于陽光下，避免高溫、干燥造成填料的老化和破壞。
4.避免受力過大：避免填料受到過大的擠壓和撞擊。
5.定期檢查：定期檢查填料的狀態(tài)和性能，避免使用失效或損壞的填料。
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