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大鼠胃動素ELISA試劑盒使用說明書

來源:上海滬峰化工有限公司   2012年08月08日 15:42  

大鼠胃動素ELISA試劑盒使用說明書

公司立足于生命科學領域,全力打造高品質生物科技產品鏈和技術服務鏈,立志成為生命科學研究領域的問題解決專家。

“的產品、周到的服務”是公司的核心理念;

“協(xié)同發(fā)展,多元共贏”是公司的價值觀;

“以客戶需求為中心,以一整套的服務與產品來滿足客戶的需求”是公司的運營模式。

 (用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內) 用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內
大鼠ELISA試劑盒原理
本實驗采用雙抗體夾心 ABC-ELISA 法。用抗大鼠 Motilin 單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中 的 Motilin 與單抗結合,加入生物素化的抗大鼠 Motilin,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標 記的 Streptavidin 與生物素結合, 加入底物工作液顯藍色, zui后加終止液硫酸, 在450nm 處測 OD 值, Motilin 濃度與 OD 值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中 Motilin 濃度。
試劑盒組成(2-8保存) 劑盒組成( 保存)
酶標板(Coated Wells) 10×標本稀釋液(Sample Buffer) 標準品(Standards) :40ng/瓶 96孔 12ml 2瓶 酶標抗體工作液(Enzyme Conjugate) 20×濃縮洗滌液(Wash Buffer) 底物工作液(TMB Solution) 終止液(Stop Solution) 12ml 50ml 12ml 12ml
*抗體工作液 (Biotinylated Antibody) 12ml
準備試劑與收集血樣
1. 收集標本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝) 、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測, 2-8保存48小時;更長時間須冷凍(-20 -70 )保存,避免反復凍融。 2. 標準品液配制:使用前加入1ml 蒸餾水混勻,配成40ng/ml 的溶液。設標準管8管,*管加標本 稀釋液900ul, 第二至第八管加入標本稀釋液500ul。 在*管中加入40ng/ml 的標準品溶液100ul 混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul 棄去。 第八管為空白對照。 3. 10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml 濃稀釋液+9ml 蒸餾水) 。 4. 洗滌液:用重蒸水 重蒸水1:20稀釋(示例:1ml 濃縮洗滌液加入19ml 的重蒸水) 重蒸水
大鼠elisa試劑盒檢測程序
1. 加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應板充分混勻后置37120分鐘。 2. 洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。 3. 每孔中加入*抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置3760分鐘。 4. 洗板:同前。 5. 每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置3730分鐘。 6. 洗板:同前。 7. 每孔加入底物工作液100ul,置37 暗處反應15分鐘。 8. 每孔加入100ul 終止液混勻。 9. 30分鐘內用酶標儀在450nm 處測吸光值。
結果計算與判斷
1. 所有 OD 值都應減除空白值后再行計算。 2. 以標準品40002000、1000、500、250、125、62.50 pg/ml 為橫坐標,OD 值為縱坐標,在坐 標紙上作圖,畫出標準曲線。 3. 根據樣品 OD 值在該曲線圖上查出相應 Motilin 含量。

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