蛋白質(zhì)翻譯后修飾(Protein post-translational modifications, PTMs)是指蛋白質(zhì)翻譯后通過激酶、磷酸酶等多種酶在氨基酸殘基上添加或去除化學基團,從而改變蛋白質(zhì)的結(jié)構、功能、穩(wěn)定性和相互作用。目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的PTMs類型超過400種,常見的PTMs包括磷酸化(phosphorylation)、糖基化(glycosylation)、甲基化(methylation)、泛素化(Ubiquitination)、乙酰化(Acetylation)等。這些修飾在細胞信號轉(zhuǎn)導、基因表達調(diào)控、蛋白質(zhì)穩(wěn)定性、細胞周期和分裂分化等方面發(fā)揮著重要作用。
常見的PTMs
泛素化
泛素化將小分子蛋白泛素(Ubiquitin)通過一系列酶促反應(包括泛素激活酶E1、泛素結(jié)合酶E2和泛素連接酶E3)共價連接到目標蛋白質(zhì)上,形成泛素鏈。泛素是分子量約8.5kDa,廣泛存在于所有真核細胞中,這個過程可以導致蛋白質(zhì)的降解、信號傳導、細胞周期調(diào)控、自噬內(nèi)吞、DNA修復損傷等多種生物學效應。
磷酸化
磷酸化通過激酶的催化作用在特定氨基酸殘基(絲氨酸、蘇氨酸或酪氨酸)上添加磷酸基團,從而調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)的活性、穩(wěn)定性、相互作用和亞細胞定位,對細胞信號傳導、細胞周期調(diào)控、能量代謝等生物學過程發(fā)揮著至關重要的作用,其異常調(diào)控與多種疾病包括癌癥和神經(jīng)退行性疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關。
乳酸化
乳酸化是指將乳酸分子的羧基與蛋白質(zhì)的氨基酸殘基(通常是賴氨酸的ε-氨基)通過酰胺鍵連接起來,這一過程可以改變蛋白質(zhì)的電荷狀態(tài)和親水性,影響其穩(wěn)定性、構象、活性和細胞內(nèi)定位。乳酸化在細胞代謝調(diào)節(jié)和疾病發(fā)展中,特別是在缺氧條件下,可能發(fā)揮重要的調(diào)控作用。
4-HNE修飾
4-羥基壬烯醛(4-Hydroxynonenal,HNE)修飾是一種重要的蛋白質(zhì)翻譯后修飾,通常發(fā)生在蛋白質(zhì)的半胱氨酸、組氨酸、賴氨酸以及部分精氨酸側(cè)鏈上。HNE是脂質(zhì)過氧化的重要定量產(chǎn)物之一,具有高毒性,能夠與蛋白質(zhì)發(fā)生反應形成加合物,影響蛋白質(zhì)的功能。4-HEN是一種重要的脂質(zhì)過氧化標志物,在鐵死亡過程中會大量積聚。
PTMs與疾病
PTMs與代謝性疾病、心血管疾病、神經(jīng)退行性疾病和炎癥性疾病等多種疾病相關。
糖尿病:PTMs通過調(diào)控信號級聯(lián)反應影響胰島β細胞的胰島素分泌,進而與糖尿病的發(fā)展相關。
非酒精性脂肪肝?。∟AFLD):PTMs通過調(diào)節(jié)脂質(zhì)合成、脂肪分解和脂肪酸β-氧化等過程參與NAFLD的發(fā)病機制。E3泛素連接酶TRIM56通過泛素化修飾脂肪酸合成關鍵蛋白FASN來延緩非酒精性脂肪肝病。
動脈粥樣硬化:PTMs如磷酸化、乙?;刃揎椨绊懼|(zhì)代謝途徑中關鍵蛋白的活性,可能導致血脂異常,進而促進動脈粥樣硬化。乙?;ㄟ^調(diào)節(jié)組蛋白和核蛋白的乙酰化和去乙?;绊憚用}粥樣硬化的過程。
神經(jīng)退行性疾病:異常的PTMs可能導致蛋白質(zhì)錯誤折疊和聚集,在阿爾茨海默病中,tau蛋白的異常磷酸化與神經(jīng)纖維纏結(jié)的形成有關,這是該疾病的標志之一。
炎癥反應:磷酸化可以激活或抑制炎癥信號通路中的關鍵轉(zhuǎn)錄因子,乙?;瘎t可能調(diào)節(jié)組蛋白和非組蛋白的活性,進而影響炎癥相關基因的轉(zhuǎn)錄。異常的PTMs可能導致炎癥過程失衡。
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泛修飾抗體
Ubiquitin:MG-132處理前后的處理的HT-1080 全細胞裂解液
Phospho-Tyrosine :Sodium pervanadate處理前后的HeLa全細胞裂解液
4-HNE:BSA和BSA-HNE
蛋白修飾抗體
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