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凝膠色譜儀日常維護(hù):色譜柱再生、泵密封更換與基線校準(zhǔn)

來源:上海杜凱生物科技有限公司   2025年07月10日 11:32  
  一、色譜柱再生:恢復(fù)分離效能的關(guān)鍵步驟
  凝膠色譜柱長期使用后,可能因樣品殘留或微生物污染導(dǎo)致柱效下降。再生流程需根據(jù)污染物類型選擇方法:
  有機(jī)物污染:用純甲醇或乙腈以0.5mL/min流速?zèng)_洗2-4小時(shí),置換凝膠孔隙中的疏水雜質(zhì)。
  鹽沉積或蛋白質(zhì)污染:采用階梯式?jīng)_洗法,先用50%乙腈+0.1%TFA)沖洗1小時(shí),再換用0.1MNaOH溶液沖洗2小時(shí)(需確認(rèn)色譜柱耐受pH),最后用純水平衡至中性。
  再生后驗(yàn)證:注射標(biāo)準(zhǔn)樣品(如聚乙二醇或藍(lán)葡聚糖),對比再生前后保留時(shí)間與峰形,若理論塔板數(shù)恢復(fù)至初始值的80%以上,則再生成功。
  二、泵密封更換:保障流速穩(wěn)定的核心操作
  泵密封磨損會(huì)導(dǎo)致漏液或壓力波動(dòng),需定期更換:
  更換時(shí)機(jī):若發(fā)現(xiàn)泵頭有液體滲出、壓力不穩(wěn)定或流速誤差超過±2%,需立即更換密封圈。
  操作步驟:關(guān)閉儀器電源,排空系統(tǒng)壓力;拆卸泵頭,取出舊密封圈(注意方向);用異丙醇清潔密封槽,安裝新密封圈并涂抹硅脂潤滑;重新組裝后,用純水以0.1mL/min流速排氣泡,逐步升至目標(biāo)流速。
  注意事項(xiàng):避免使用尖銳工具觸碰密封圈,防止劃傷;更換后需運(yùn)行至少30分鐘,觀察壓力是否穩(wěn)定。
  三、基線校準(zhǔn):確保數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性的基礎(chǔ)
  基線漂移或噪聲過高會(huì)影響定量結(jié)果,需定期校準(zhǔn):
  校準(zhǔn)前準(zhǔn)備:用純流動(dòng)相沖洗系統(tǒng)至基線穩(wěn)定(通常需2-4小時(shí)),確保檢測器池溫度與柱溫一致。
  校準(zhǔn)方法:進(jìn)入儀器軟件“基線校準(zhǔn)”模塊,采集空白溶劑信號,自動(dòng)扣除背景噪聲;若手動(dòng)校準(zhǔn),需記錄基線偏移值,在數(shù)據(jù)分析時(shí)修正。
  維護(hù)建議:每月檢查一次基線穩(wěn)定性,若噪聲>0.5mAU(UV檢測器)或漂移>0.1mAU/min,需清洗檢測器流通池或更換氘燈。

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