對(duì)所有魚(yú)類(lèi)樣品進(jìn)行解剖和清洗,去除皮膚、頭部、尾部、內(nèi)臟及骨,對(duì)剩余組織進(jìn)行勻漿處理,之后于-18 ℃條件下保存。

準(zhǔn)確稱(chēng)取2.0 g上述勻漿后的樣品,置于50 mL離心管中,加入20 μL內(nèi)標(biāo)混合工作溶液,混合均勻,隨后加入5 mL超純水和10 mL 2%甲酸乙腈,超聲提取15 min;向上述樣品中加入0.9 g NaCl和3.6 g無(wú)水MgSO₄,渦旋振蕩1 min,在3000 r/min下離心5 min;離心后取2 mL上清液至含有20 mg Fe₃O₄-TiO₂、20 mg PSA和120 mg無(wú)水MgSO₄的離心管中,充分混勻30 s后再置于磁分離架上進(jìn)行分離;經(jīng)3 s磁分離后,取1 mL上清液過(guò)0.22 μm有機(jī)濾膜,進(jìn)行UHPLC-MS/MS分析。

為了控制樣品前處理過(guò)程可能帶來(lái)的外源性污染,實(shí)驗(yàn)過(guò)程中均避免使用聚四氟乙烯材質(zhì)的器皿。

色譜柱:Luna Omega C18柱(100 mm×2.1 mm, 1.6 μm,美國(guó)Phenomenex公司);柱溫箱溫度:35 ℃。流動(dòng)相:A相為10 mmol/L乙酸銨甲醇-水(1∶9, v/v), B相為10 mmol/L乙酸銨甲醇,流速0.25 mL/min。梯度洗脫程序:0~10 min, 10%B~100%B; 10~13 min, 100%B; 13~13.5 min, 100%B~10%B; 13.5~15 min, 10%B。總運(yùn)行時(shí)間:15 min;進(jìn)樣體積:2 μL。

離子源:電噴霧電離(ESI)源;毛細(xì)管電壓:4000 V;毛細(xì)管溫度:300 ℃;加熱塊溫度:400 ℃;脫溶劑管溫度: 250 ℃。干燥氣(氮?dú)?、加熱氣(空氣)、霧化氣(氮?dú)?的流速分別為10、10、3 L/min,其中氮?dú)庥傻獨(dú)獍l(fā)生器提供,碰撞氣為氬氣。數(shù)據(jù)采集模式:多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)模式。13種PFASs的質(zhì)譜分析參數(shù)如原文表1所示,其中每個(gè)離子對(duì)的駐留時(shí)間為2 ms。

在浙江省不同養(yǎng)殖基地采集11個(gè)魚(yú)樣品(包含4個(gè)鯉魚(yú)、3個(gè)鱸魚(yú)、2個(gè)白條魚(yú)、1個(gè)鯽魚(yú)和1個(gè)大黃魚(yú)),并利用本文建立方法進(jìn)行檢測(cè),以驗(yàn)證該方法的實(shí)用性。當(dāng)測(cè)定結(jié)果低于LOQ時(shí),認(rèn)為樣品無(wú)檢出。結(jié)果如原文表4所示,11個(gè)魚(yú)類(lèi)樣品均有PFASs檢出,檢出的PFASs分別為全氟辛基磺酸(PFOS)、全氟十一烷酸(PFUnDA)、全氟辛酸(PFOA)、全氟十二烷酸(PFDoDA)和全氟十三烷酸(PFTrDA);其中,PFOS的檢出率(100%)和檢出總含量(1.728 μg/kg)最高,其次分別為PFUnDA(檢出總含量1.208 μg/kg)、PFOA(檢出總含量0.931 μg/kg)、PFDoDA(檢出總含量0.680 μg/kg)和PFTrDA(檢出總含量0.327 μg/kg),這與文獻(xiàn)報(bào)道結(jié)果基本一致;并且,除PFOS外,其余4種檢出的PFASs均屬于長(zhǎng)鏈羧酸類(lèi)PFASs。由上述結(jié)果推測(cè),魚(yú)類(lèi)樣品中的主要PFASs污染因子為PFOS及長(zhǎng)鏈羧酸類(lèi)PFASs。根據(jù)文獻(xiàn)[30]報(bào)道,基于魚(yú)體的代謝機(jī)制,長(zhǎng)鏈羧酸類(lèi)PFASs及PFOS在魚(yú)類(lèi)樣品中具有很強(qiáng)的生物累積和生物放大能力。此外,對(duì)長(zhǎng)鏈羧酸類(lèi)PFASs的檢出原因進(jìn)行分析,由于長(zhǎng)鏈羧酸類(lèi)PFASs具有較高的親脂性,其在生物體內(nèi)累積的可能性更高,同時(shí)PFASs在生物體內(nèi)的富集作用會(huì)隨其鏈長(zhǎng)的增加而增大。上述結(jié)果說(shuō)明,本文所建立方法在實(shí)際魚(yú)類(lèi)樣品檢測(cè)中具有較大的應(yīng)用潛力。