臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)與主要用途及相關(guān)研究!
臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(Mesenchymal Stem Cells,MSCs)是指存在于新生兒臍帶組織中的一種多功能干細(xì)胞,它能分化成許多種組織細(xì)胞,具有廣闊的臨床應(yīng)用前景。應(yīng)用滅活臍帶血清培養(yǎng)體系可成功擴(kuò)增人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞,培養(yǎng)的細(xì)胞具有間充質(zhì)干細(xì)胞的基本特性,為建立間充質(zhì)干細(xì)胞庫(kù)和臨床應(yīng)用提供了理論依據(jù)。
一、概念
臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞是以人臍帶血血清為主體的培養(yǎng)體系的臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)擴(kuò)增的方法:流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果顯示,貼壁細(xì)胞均表達(dá)CD44、CD29,低表達(dá)CD106,不表達(dá)造血細(xì)胞表型CD14、CD34、CD45和內(nèi)皮細(xì)胞表型CD31,也不表達(dá)HLA-DR:細(xì)胞倍增時(shí)間為30h,細(xì)胞周期分析表明,G0~G1期和+G2+M期所占比例分別為78.84%和11.16%。
二、優(yōu)勢(shì)
臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)具有較高的分化潛能,可向多個(gè)方向進(jìn)行分化。它在骨、軟骨、肌肉、肌腱、韌帶、神經(jīng)、肝、內(nèi)皮和心肌等組織工程方面具有廣闊的臨床應(yīng)用前景。有報(bào)道從人臍帶中分離出MSCs,且細(xì)胞含量、增殖能力優(yōu)于骨髓MSCs,免疫原性比骨髓MSCs低,并且具有取材方便,無(wú)倫理學(xué)爭(zhēng)議等優(yōu)點(diǎn),因此越來(lái)越受到研究工作者們的關(guān)注。干細(xì)胞的培養(yǎng)體系主要應(yīng)用含動(dòng)物血清(如胎牛血清)的培養(yǎng)基,在此種環(huán)境下生長(zhǎng)的干細(xì)胞,其內(nèi)部結(jié)構(gòu)會(huì)發(fā)生何種變化尚未可知,為避免含動(dòng)物血清培養(yǎng)中病毒等病原體污染和異種血清所致的過(guò)敏反應(yīng),課題組進(jìn)行了以人臍帶血血清為主體的培養(yǎng)體系體外培養(yǎng)擴(kuò)增臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究。以探討人臍帶血血清替代動(dòng)物血清用于培養(yǎng)臨床組織工程用干細(xì)胞的可行性。同時(shí)研究臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞形態(tài)學(xué)、生長(zhǎng)特性、細(xì)胞周期、免疫表型等特性,旨在建立臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的富集方法,為建立臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞庫(kù)和臨床應(yīng)用提供有力的理論依據(jù)。
三、分離培養(yǎng)
取新鮮健康臍帶,用PBS沖洗干凈后,用剪刀鑷子剔去血管,剝出里面的華氏膠組織,將所得組織充分剪碎至1 mm3大小,加入α-MEM培養(yǎng)液置于37℃,5%的CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng),培養(yǎng)液中含10% FBS,100U/ml青霉素,100U/ml鏈霉素。臍帶組織培養(yǎng)5-7天后,可見(jiàn)有部分細(xì)胞從組織塊周?chē)莱觯螒B(tài)呈細(xì)小的梭形,一周后,細(xì)胞開(kāi)始迅速增殖,形成大小不等的細(xì)胞集落,待細(xì)胞長(zhǎng)滿后,用0.25%胰蛋白酶消化傳代。
四、用途
1、能具有較強(qiáng)的免疫調(diào)節(jié)作用,可用于治療紅斑狼瘡和硬皮病等自身免疫性疾病,降低細(xì)胞或后的免疫排斥反應(yīng),提高細(xì)胞或的成功率;
2、能促進(jìn)造血恢復(fù)功能,與單一造血干細(xì)胞移植比較,間充質(zhì)干細(xì)胞和造血干細(xì)胞共移植能顯著提高白血病和難治性貧血等疾病的治療效果;
3、能修復(fù)損傷或病變的組織器官,用于治療骨和肌肉衰退性疾病、心腦血管疾病、肝病、腦及脊髓神經(jīng)損傷和老年癡呆等。
五、干細(xì)胞研究
1、期刊簡(jiǎn)介
《中國(guó)組織工程研究》雜志(原《中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù)》)由中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部主管,中國(guó)康復(fù)醫(yī)學(xué)會(huì)與《中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù)》雜志社主辦。
雜志發(fā)表關(guān)于干細(xì)胞;組織構(gòu)建;生物材料;骨關(guān)節(jié)植入物;組織器官細(xì)胞移植以及計(jì)算機(jī)輔助數(shù)字化技術(shù)的應(yīng)用基礎(chǔ)及臨床研究,轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)和偱證醫(yī)學(xué)研究,發(fā)表中國(guó)組織工程研究領(lǐng)域的學(xué)術(shù)、技術(shù)創(chuàng)新成果。
2、研究對(duì)象
胚胎干細(xì)胞,臍帶干細(xì)胞,軟骨干細(xì)胞,臍血干細(xì)胞,羊膜干細(xì)胞,羊水干細(xì)胞,骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,造血干細(xì)胞,腫瘤干細(xì)胞,精原干細(xì)胞,生殖干細(xì)胞,成骨干細(xì)胞,肌肉干細(xì)胞,神經(jīng)干細(xì)胞,脂肪干細(xì)胞,心臟干細(xì)胞,氣管干細(xì)胞,肝臟干細(xì)胞,胰腺干細(xì)胞,胃腸干細(xì)胞,內(nèi)皮干細(xì)胞,角膜干細(xì)胞,皮膚干細(xì)胞,毛囊干細(xì)胞,乳腺干細(xì)胞,前列腺干細(xì)胞,涎腺干細(xì)胞等干細(xì)胞相關(guān)基礎(chǔ)與臨床研究成果,以及血液疾病的造血干細(xì)胞移植相關(guān)問(wèn)題……
3、研究?jī)?nèi)容
干細(xì)胞研究的生物學(xué)特性、培養(yǎng)與分化、誘導(dǎo)技術(shù)、干細(xì)胞與微環(huán)境、干細(xì)胞與微小RNA調(diào)節(jié)、干細(xì)胞因子及相關(guān)因子、干細(xì)胞表型與鑒定、干細(xì)胞移植與免疫耐受、細(xì)胞移植與基因表達(dá)、細(xì)胞編程與表觀遺傳、干細(xì)胞保存與質(zhì)量、干細(xì)胞實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型等學(xué)術(shù)和技術(shù)的熱點(diǎn)問(wèn)題。
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