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致病微生物檢測(cè)方法

來源:廣州雙螺旋基因技術(shù)有限公司   2025年07月24日 10:01  
  致病微生物檢測(cè)方法多樣,包括傳統(tǒng)檢測(cè)方式與現(xiàn)代快速檢測(cè)技術(shù),具體如下:
 
  一、傳統(tǒng)檢測(cè)方式
 
  涂片鏡檢
 
  原理:將樣本(如血、痰、尿液、糞便等)染色后置于顯微鏡下觀察,通過形態(tài)、排列等特征初步判斷病原體類型。
 
  特點(diǎn):簡便快速,適用于特殊形態(tài)病原體(如結(jié)核分枝桿菌、螺旋體)的早期診斷,但無法區(qū)分死菌與活菌,且對(duì)操作人員經(jīng)驗(yàn)要求較高。
 
  應(yīng)用:基層實(shí)驗(yàn)室常用方法,如淋球菌感染、結(jié)核病的初步篩查。
 
  分離培養(yǎng)與生化反應(yīng)
 
  原理:將樣本接種于適宜培養(yǎng)基,通過菌落形態(tài)、生化試驗(yàn)(如吲哚試驗(yàn)、VP試驗(yàn))鑒定微生物種類。
 
  特點(diǎn):檢測(cè)價(jià)值高,但耗時(shí)較長(需數(shù)天至數(shù)周),且部分微生物難以培養(yǎng)(如病毒、支原體)。
 
  應(yīng)用:痰液、糞便、血液等樣本中細(xì)菌的分離與鑒定,如肺炎克雷伯菌的藥敏試驗(yàn)。
 
  組織細(xì)胞培養(yǎng)
 
  原理:將病原微生物接種于活細(xì)胞或敏感動(dòng)物體內(nèi),觀察細(xì)胞病變或動(dòng)物組織器官變化。
 
  特點(diǎn):適用于病毒、立克次體等難以培養(yǎng)的微生物,但操作復(fù)雜、周期長。
 
  應(yīng)用:病毒分離(如流感病毒)、衣原體檢測(cè)。
 
  二、現(xiàn)代快速檢測(cè)技術(shù)
 
  聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)
 
  原理:通過特異性引物擴(kuò)增微生物DNA片段,實(shí)現(xiàn)快速、靈敏檢測(cè)。
 
  特點(diǎn):
 
  高靈敏度:可檢測(cè)極微量核酸(如單個(gè)細(xì)菌基因組)。
 
  高特異性:引物設(shè)計(jì)針對(duì)保守基因區(qū)域,減少假陽性。
 
  快速:數(shù)小時(shí)內(nèi)完成檢測(cè),適用于早期診斷。
 
  應(yīng)用:
 
  性傳播疾病:如淋球菌、沙眼衣原體檢測(cè)。
 
  腸道感染:如諾如病毒、輪狀病毒檢測(cè)。
 
  呼吸道感染:如新冠病毒、流感病毒檢測(cè)。
 
  基因芯片技術(shù)
 
  原理:將高密度DNA探針固定于固相表面,通過雜交反應(yīng)同時(shí)檢測(cè)多種微生物。
 
  特點(diǎn):
 
  高通量:單次檢測(cè)可覆蓋數(shù)百種病原體。
 
  快速:4小時(shí)內(nèi)完成菌種判斷。
 
  耐藥性分析:可檢測(cè)耐藥基因(如MRSA的mecA基因)。
 
  應(yīng)用:食物中毒病原菌篩查、醫(yī)院感染暴發(fā)調(diào)查。
 
  核酸雜交技術(shù)
 
  原理:利用標(biāo)記探針與病原微生物核酸特異性結(jié)合,通過信號(hào)檢測(cè)實(shí)現(xiàn)鑒定。
 
  類型:
 
  核酸原位雜交:直接檢測(cè)病原體細(xì)胞中的核酸。
 
  膜上印跡雜交:將病原體核酸純化后與探針雜交。
 
  特點(diǎn):操作簡便、快速,適用于敏感、特異的病原微生物檢測(cè)。
 
  應(yīng)用:結(jié)核分枝桿菌、HPV病毒檢測(cè)。
 
  免疫學(xué)檢測(cè)
 
  原理:利用抗原-抗體特異性結(jié)合反應(yīng)檢測(cè)病原微生物。
 
  方法:
 
  酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA):通過酶標(biāo)記抗體檢測(cè)樣本中抗原或抗體。
 
  免疫熒光技術(shù):用熒光標(biāo)記抗體直接觀察病原體。
 
  免疫磁珠分離技術(shù):利用磁珠微球分離特定病原體,縮短檢測(cè)時(shí)間(如白色念珠菌檢測(cè)可縮短4小時(shí))。
 
  特點(diǎn):快速、靈敏,適用于低濃度或難培養(yǎng)微生物檢測(cè)。
 
  應(yīng)用:HIV抗體檢測(cè)、乙肝表面抗原檢測(cè)。
 
  二代測(cè)序技術(shù)(NGS)
 
  原理:通過宏基因組測(cè)序全面分析樣本中所有微生物種類。
 
  特點(diǎn):
 
  無偏性檢測(cè):無需預(yù)設(shè)目標(biāo),可發(fā)現(xiàn)未知病原體。
 
  高分辨率:準(zhǔn)確鑒定到種或亞型水平。
 
  應(yīng)用:復(fù)雜感染(如中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染)、新發(fā)傳染病(如新冠病毒)的病原鑒定。
 
 

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