正確操作二氧化碳搖床(CO? Incubator)需要遵循以下步驟,以確保細胞培養(yǎng)環(huán)境的穩(wěn)定性和實驗結(jié)果的可靠性:
一、操作前準(zhǔn)備
1. 檢查設(shè)備狀態(tài)
確認電源、CO?氣源連接正常,氣壓穩(wěn)定(通常為0.1~0.2 MPa)。
檢查水箱水位(如為水套式),確保水位在標(biāo)記范圍內(nèi)。
清潔內(nèi)腔:使用75%酒精或無腐蝕性消毒劑擦拭內(nèi)壁、擱板和傳感器,避免污染。
2. 預(yù)熱與平衡
提前24小時開機預(yù)熱(尤其水套式),設(shè)定溫度至37℃(或其他所需溫度)。
設(shè)置CO?濃度(通常5%),待數(shù)值穩(wěn)定后再放入細胞。
二、日常使用步驟
1. 放入培養(yǎng)物
開門時間盡量短(<30秒),避免溫濕度及CO?濃度波動。
培養(yǎng)瓶/皿擺放需留空隙,保證氣流循環(huán)均勻。
2. 參數(shù)設(shè)置與監(jiān)控
溫度:37℃(哺乳動物細胞常用),誤差范圍±0.1℃。
CO?濃度:5%(根據(jù)培養(yǎng)基需求調(diào)整),通過紅外或熱導(dǎo)傳感器校準(zhǔn)。
濕度:維持≥95% RH(通過托盤注滅菌水或自動加濕系統(tǒng))。
3. 防污染措施
定期更換滅菌水(每周1次),避免微生物滋生。
使用含銅內(nèi)膽或紫外滅菌功能(如有)降低污染風(fēng)險。
三、維護與注意事項
1. 定期校準(zhǔn)
每年至少1次專業(yè)校準(zhǔn)(溫度、CO?濃度、濕度)。
日??捎锚毩鞲衅鳎ㄈ缡殖质紺O?檢測儀)交叉驗證。
2. 清潔與消毒
每月*底清潔:斷電后拆卸擱板、支架,高溫高壓滅菌或酒精浸泡。
避免使用腐蝕性清潔劑(如次氯酸鈉),以防損壞傳感器。
3. 故障處理
CO?濃度不穩(wěn)定:檢查氣瓶壓力、管路漏氣或傳感器故障。
溫度異常:水套式檢查水位,氣套式確認加熱系統(tǒng)是否正常。
長期停用時排空水箱,斷電并關(guān)閉氣源。
四、安全提示
CO?泄漏風(fēng)險:確保通風(fēng)良好,安裝CO?報警器(濃度>5000 ppm有窒息危險)。
生物安全:操作時戴手套,培養(yǎng)物泄漏需立即消毒處理。
附:快速操作流程圖
開機預(yù)熱 → 設(shè)置參數(shù) → 穩(wěn)定后放入細胞 → 監(jiān)控記錄 → 定期維護
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