5. Q：明確標(biāo)明種屬的試劑盒可以用來檢測其他種屬的樣本么？

A：ELISA試劑盒嚴(yán)格區(qū)分種屬，一般不推薦跨種屬檢測，不同種屬的同一個指標(biāo)同源性相差可能會很大，抗體的特異性要求比較高，不同種屬樣本與抗體結(jié)合能力會有很大差別。

6. Q：ELISA試劑盒只能檢測血清、血清、細(xì)胞上清液么？

A：通常我們可用于ELISA檢測的樣本是有多種類型的，可以是血清、血漿、細(xì)胞上清等常規(guī)樣品，也可以是尿液、細(xì)組織勻漿液、細(xì)胞裂解液等，不同類型的檢測樣本前期的處理方法是不一樣的。樣品中含有影響生物活性的物質(zhì)會影響檢測結(jié)果。

7. Q：試劑盒中的酶標(biāo)板是包被好的么？

A：劑盒中提供的包被板已經(jīng)包被過檢測抗體，可以直接使用。進(jìn)行ELISA實(shí)驗(yàn)時僅限使用本試劑盒中的組分，不能使用別的板條進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。96孔酶標(biāo)板是可拆的，每條8孔?？梢愿鶕?jù)自己的實(shí)驗(yàn)取出部分板條使用，剩余的酶標(biāo)板放回含有干燥劑的鋁箔袋中，4度保存，不會影響酶標(biāo)板性能。若拆封的酶標(biāo)板沒有正確儲存，導(dǎo)致板子受潮，可能會影響檢測結(jié)果。用過的板條不可重復(fù)使用。

8. Q：試劑盒在使用前要室溫放置30min ，目的是什么？

A：ELISA試劑盒對于溫度的要求比較嚴(yán)格，溫度是ELISA結(jié)合反應(yīng)的重要影響因素，這樣做主要是為了使試劑溫度一致，在后面的溫育反應(yīng)步驟中，能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度能較快地達(dá)到所要求的高度，以滿足測定要求。

9. Q：試劑盒保存溫度是多少度？為什么說明書上寫的標(biāo)準(zhǔn)品是-20度，標(biāo)簽上寫的是4度呢？

A：試劑盒保存溫度是4度，說明書中只有標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)注的保存溫度是-20度，由于標(biāo)準(zhǔn)品是凍干的重組蛋白，-20度保存會延長重組蛋白的保存期限。試劑盒的有效期是6個月，凍干的重組蛋白能夠在4度保存6個月，但是如果有條件或者想更長時間保存，還是建議能夠?qū)?biāo)準(zhǔn)品-20度保存。

10. Q：樣本收集后不能及時檢測低溫保存可以放多久？

A：樣本收集后24之內(nèi)進(jìn)行檢測，放在4度冰箱即可。如果樣本收集后不能立即檢測，需將樣本置于低溫冰箱中，樣本3個月內(nèi)檢測可于-20度保存，若存放時間更久，需要用-80度冰箱保存。

11. Q：樣品反復(fù)凍融影響大么？

A：樣品反復(fù)凍融對蛋白影響非常大，能導(dǎo)致蛋白降解，非常不建議反復(fù)凍融樣品。一般蛋白含量豐富的樣本例如血清/血漿反復(fù)凍融1-2次，對于檢測結(jié)果影響不是非常大，但是其他類型的樣本，例如細(xì)胞上清液、肺泡灌洗液，反復(fù)凍融會使蛋白降解嚴(yán)重，對檢測結(jié)果影響非常大。

12. Q：生物素化抗體和酶結(jié)合物，稀釋后沒用完，還可以再用嗎？

A：稀釋后的生物素化抗體和酶結(jié)合物建議在當(dāng)天用完，放置時間太長可能會影響其活性?？筛鶕?jù)自己實(shí)驗(yàn)所需用量進(jìn)行配制，不建議過量配制。