13. Q:變異系數(shù)(CV)較大的原因?
A:
可能原因 | 參考解決方案 |
孔中有氣泡 | 加樣小心,避免讀數(shù)前產(chǎn)生氣泡 |
孔板洗滌不均/不充分 | 確保每次洗滌達到要求,按建議洗滌 |
試劑混合不充分 | 確保試劑已充分混合 |
加樣量不一樣 | 使用校準好的移液器確保每孔加樣量一致 |
邊緣效應 | 試劑盒提前恢復室溫,保證所有試劑溫度一致 |
樣品制備/保存不一致 | 確保始終如一的樣品,避免不同批次/保存條件造成的差異 |
14. Q:標準曲線較差?
A:
可能原因 | 參考解決方案 |
標準品稀釋不當 | 確認是否正確稀釋 |
標準品復溶不當 | 標準品復溶前短暫離心,確保是否充分溶解 |
標準品降解 | 確認保存方式及存放時間 |
曲線和標度不適合 | 嘗試不同的擬合方式 |
邊緣效應 | 試劑盒提前恢復室溫,保證所有試劑溫度一致 |
移液出錯 | 使用校準好的移液器和正確的移液方法 |
標準品有污染 | 小心操作,避免污染 |
錯誤的孵育時間或溫度 | 按照說明書的流程中操作 |
15. Q:高背景或陰性對照值偏高
A:
可能原因 | 參考解決方案 |
洗板不充分 | 將洗滌液注入反應孔充分洗滌,充分拍干孔中液體 |
酶結(jié)合物過量 | 檢查酶稀釋度,按說明書標識的稀釋度稀釋 |
底物污染 | 加底物前檢查底物是否為透明無色,請勿用變藍的底物,重新用新的底物試驗 |
陰性對照孔被陽性對照污染 | 注意洗滌時不要把洗液溢出孔外,不使陰陽對照孔液體漣接一起 |
不同批次試劑混用 | 檢查試劑批號,請勿用不同批次試劑 |
終止后太長時間讀數(shù) | 終止后應立即讀數(shù) |
16. Q:顯色信號弱
A:
可能原因 | 參考解決方案 |
試劑過期 | 檢查試劑盒有效期,請勿用過期試劑 |
孵育時間過短 | 按說明書中規(guī)定的時間孵育 |
試劑污染 | 檢查試劑是否污染,請勿用污染的試劑 |
酶標儀濾光片不匹配 | 檢查酶標儀設置及濾光片是否匹配 |
試劑盒平衡不充分 | 確保試劑盒試驗前平衡至室溫 |
顯色時間不夠 | 增加底物顯色時間 |
17. Q:無顯色信號
A:
可能原因 | 參考解決方案 |
檢測抗體、酶、或顯色劑漏加 | 檢查試驗操作流程,重復試驗 |
酶被疊氮鈉污染 | 請使用重新配制的試劑 |
試劑添加順序有誤 | 檢查復核試驗添加順序、流程,重復試驗 |
波長不正確 | 核實檢測波長 |
18. Q:標曲佳但樣品孔無信號
A:
可能原因 | 參考解決方案 |
樣品中靶標物含量低或樣品中無靶標物 | 設置陽性對照,重復實驗 |
樣品基質(zhì)效應影響檢測 | 重新稀釋樣品后復測 |
標曲選擇不合適 | 更換擬合方式,選最合適的擬合方式 |
樣本含量低于靈敏度 | 濃縮樣本或更換靈敏度更高的試劑盒 |
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