C18色譜柱作為反相液相色譜的核心組件,其性能直接影響分離效果與實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性。以下是系統(tǒng)性養(yǎng)護(hù)方案:?
一、規(guī)范操作基礎(chǔ)?
1. 裝卸與更換:操作需輕柔避震,接頭松緊適度防漏液或柱床空隙。頻繁切換樣品類型時(shí),建議配置專用柱以減少交叉污染風(fēng)險(xiǎn)。?
2. 流動(dòng)相管理:使用前嚴(yán)格脫氣避免氣泡損害柱效;樣品需預(yù)處理過濾去除顆粒物。更換流動(dòng)相應(yīng)確保溶劑互溶性,防止鹽析堵塞。?
3. 壓力與溫度控制:操作壓力應(yīng)低于填裝上限,推薦控制在最高壓力一半以下;啟用柱溫計(jì)時(shí)需提前通入流動(dòng)相再升溫。?
二、化學(xué)環(huán)境維護(hù)?
1. pH值控制:流動(dòng)相pH嚴(yán)格控制在2~7區(qū)間,超出此范圍可能導(dǎo)致鍵合相的水解或硅膠基質(zhì)的溶解,進(jìn)而造成柱床損傷。?
2. 分析后沖洗:完成工作后持續(xù)沖洗不少于0.5小時(shí),清除殘留雜質(zhì)。若流動(dòng)相含鹽需先水洗,含胺類則采用50%甲醇+0.05%磷酸混合液沖洗。?
三、保存與保護(hù)措施?
1. 保存溶劑與密封:短期閑置用甲醇沖洗30~60分鐘,兩端密封保存;長(zhǎng)期存放可定期沖洗或兩端加裝甲醇容器補(bǔ)償蒸發(fā)損耗。?
2. 保護(hù)柱應(yīng)用:搭配同粒度填料的保護(hù)柱,攔截雜質(zhì)及不可逆吸附物質(zhì),延長(zhǎng)分析柱壽命。?
四、污染修復(fù)與再生?
1. 常規(guī)再生:依次用甲醇、甲醇/水各60mL沖洗,最后甲醇平衡封存。嚴(yán)重污染可嘗試酸堿溶液沖洗或逆流洗滌法。?
2. 物理修復(fù):局部污染深度較小時(shí),挖除污染段后填充相同填料修補(bǔ);柱塌陷不嚴(yán)重時(shí)可顛倒使用借助流動(dòng)相沖刷恢復(fù)。?
通過遵循上述養(yǎng)護(hù)策略,能夠顯著延長(zhǎng)C18色譜柱的使用壽命,保障實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性與可靠性。
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