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ODS色譜柱，即十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱（Octadecylsilyl），是一種常用的反相色譜柱固定相。其鍵合化學(xué)解析如下：
一、鍵合原理
ODS色譜柱的鍵合原理主要是將十八烷基氯硅烷試劑與硅膠表面的硅醇基，經(jīng)過(guò)多步反應(yīng)脫去氯化氫（HCl），生成ODS鍵合相。這個(gè)過(guò)程中，硅膠表面的硅醇基（Si-OH）與十八烷基氯硅烷的氯硅基（Si-Cl）發(fā)生縮合反應(yīng)，形成共價(jià)鍵，從而將十八烷基牢固地鍵合在硅膠表面。
二、鍵合相的分類(lèi)
根據(jù)含碳量的不同，ODS鍵合相可以分為高碳、中碳及低碳型。這些類(lèi)型的差異主要在于鍵合反應(yīng)中剩余的硅醇基數(shù)量和鍵合相的表面覆蓋度，進(jìn)而影響其極性和載樣量。一般來(lái)說(shuō)，高碳ODS鍵合相載樣量大、吸附性能也大。
三、鍵合相的特性
1.非極性：ODS鍵合相為非極性固定相，適用于反相色譜。在反相色譜中，溶質(zhì)按其疏水性大小進(jìn)行分離。極性越大、疏水性越小的溶質(zhì)越不易與非極性的固定相結(jié)合，因此會(huì)先被洗脫下來(lái)。
2.高效與耐用：ODS鍵合填料效率高、耐用，并能應(yīng)用于很多種物質(zhì)的分析。由于其長(zhǎng)鏈烷基結(jié)構(gòu)和高碳含量，使得ODS柱對(duì)各種類(lèi)型的生物大分子有更強(qiáng)的適應(yīng)能力。
3.廣泛的應(yīng)用范圍：ODS色譜柱在生物化學(xué)分析工作中應(yīng)用廣泛，特別是在氨基酸、小肽等生物分子的分析中表現(xiàn)出出色的性能。同時(shí)，它也適用于多種流動(dòng)相，如甲醇、乙腈、水等極性物質(zhì)。
四、使用注意事項(xiàng)
1.流動(dòng)相的選擇：ODS色譜柱在使用時(shí)，應(yīng)選擇合適的流動(dòng)相。常用的流動(dòng)相組合包括“甲醇-水”和“乙腈-水”。由于乙腈具有一定的毒性，通常優(yōu)先考慮使用“甲醇-水”作為流動(dòng)相。
2.pH值的控制：硅膠基質(zhì)的鍵合相只能在一定的pH范圍內(nèi)使用（如pH=2~7.5）。在分離肽類(lèi)和蛋白質(zhì)等生物大分子的過(guò)程中，經(jīng)常要加入修飾性的離子對(duì)物質(zhì)（如C?HF?O?）來(lái)調(diào)節(jié)流動(dòng)相的pH值，以抑制氨基酸上α羧基的離解，增加其疏水性，從而延長(zhǎng)洗脫時(shí)間并提高分辨率。
3.柱子的清洗與保存：實(shí)驗(yàn)后應(yīng)對(duì)ODS色譜柱進(jìn)行清洗，以去除殘留的樣品和流動(dòng)相。如果實(shí)驗(yàn)中使用緩沖鹽，應(yīng)用洪水相（如水或甲醇等極性物質(zhì)）清洗較長(zhǎng)時(shí)間以去除鹽分。清洗后，應(yīng)將柱子保存在高比例的有機(jī)相中（如85%~95%的甲醇或乙腈）以防止硅膠的干裂和鍵合相的脫落。
ODS色譜柱的鍵合化學(xué)是基于硅膠表面的硅醇基與十八烷基氯硅烷的縮合反應(yīng)。這種鍵合相具有非極性、高效與耐用以及廣泛的應(yīng)用范圍等特點(diǎn)。在使用時(shí)，需要注意流動(dòng)相的選擇、pH值的控制以及柱子的清洗與保存等問(wèn)題。
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