FITC-BSA,異硫氰酸酯熒光素-牛血清白蛋白的物理化學(xué)性質(zhì)
產(chǎn)品名稱:FITC-BSA,異硫氰酸酯熒光素-牛血清白蛋白的物理化學(xué)性質(zhì)
一、物理化學(xué)性質(zhì)
溶解性:水溶性,可溶于PBS、Tris緩沖液等水溶液。
穩(wěn)定性:需避光、干燥、低溫(-20℃)保存,避免反復(fù)凍融。熒光信號在pH 7.0–8.5范圍內(nèi)穩(wěn)定,量子產(chǎn)率約0.92。
光譜特性:
吸收波長(Ex):495 nm
發(fā)射波長(Em):519 nm
熒光特性:綠色熒光,適用于熒光顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)及多光子顯微鏡。
二、合成方法
活化BSA:
將BSA對pH 9.5的碳酸鹽緩沖液透析,調(diào)整至適宜反應(yīng)環(huán)境。
FITC標(biāo)記:
FITC溶于DMSO,按蛋白質(zhì):FITC = 1mg:150μg的比例加入BSA溶液,室溫避光反應(yīng)8小時(shí)。
加入NH?Cl終止反應(yīng),繼續(xù)避光2小時(shí)。
純化:
通過透析(MWCO 10 kDa)或凝膠過濾(如Sephadex G-50)去除未反應(yīng)的FITC,得到高純度產(chǎn)物。
表征:
紫外-可見光譜和熒光光譜確認(rèn)標(biāo)記成功,F(xiàn)/P比值(熒光素與蛋白質(zhì)量比)介于2.5–6.5之間。
圓二色譜(CD)驗(yàn)證BSA的α-螺旋含量未顯著改變。
供應(yīng)商:西安昊然生物
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