淋巴細胞介導(dǎo)的細胞毒性是一種針對細胞內(nèi)病原體（包括病毒、某些細菌和寄生蟲）的細胞免疫形式。監(jiān)測淋巴細胞介導(dǎo)的靶細胞毒性的最常見體外方法是細胞介導(dǎo)的細胞毒性檢測，例如ADCC（抗體依賴性細胞毒性）和TDCC（T細胞依賴性細胞毒性）。在這些檢測中，免疫效應(yīng)細胞和靶細胞被共同培養(yǎng)。為了分析這種異質(zhì)性細胞群體中免疫效應(yīng)細胞的細胞毒性活性，能夠區(qū)分效應(yīng)細胞和靶細胞群體是至關(guān)重要的，因為它們具有不同的表型。使用膜可滲透的熒光染料CSFE（羧基熒光素琥珀酰亞胺酯）在與效應(yīng)細胞共培養(yǎng)之前對靶細胞進行標(biāo)記，能夠清晰地區(qū)分活的效應(yīng)細胞和靶細胞。與靶細胞孵育后，可以添加DNA嵌入染料7-AAD來標(biāo)記正在死亡的靶細胞。這兩種染料具有不同的光譜特性，通過流式細胞術(shù)可以區(qū)分四種細胞群體：活靶細胞（CSFE?7-AAD?）、死靶細胞（CSFE?7-AAD?）、活效應(yīng)細胞（CSFE?7-AAD?）和死效應(yīng)細胞（CSFE?7-AAD?）。細胞毒性檢測對于理解CAR（嵌合抗原受體）T細胞和NK細胞以及基于抗體的免疫療法的效力至關(guān)重要。

細胞毒性染料試劑盒（CFSE，7-AAD）是用于確定效應(yīng)細胞對感興趣靶細胞的細胞毒性特征的試劑盒。它包含用于在靶細胞和PBMC混合細胞群體中標(biāo)記靶細胞的CFSE（羧基熒光素琥珀酰亞胺酯），以及用于標(biāo)記死細胞的7-AAD（7-氨基放線菌素D）。CFSE和7-AAD標(biāo)記使得通過流式細胞術(shù)在單細胞水平上檢測細胞毒性成為可能。試劑盒還包含檢測稀釋液。

艾美捷BPS Bioscience-細胞毒性染料試劑盒（CFSE，7-ADD）:

貨號：82296

應(yīng)用：在細胞毒性檢測中，通過流式細胞術(shù)分析活靶細胞、死靶細胞、活效應(yīng)細胞和死效應(yīng)細胞。

運輸溫度：-80℃

警告：避免凍融循環(huán)

科學(xué)分類：CAR-T細胞療法

監(jiān)管狀態(tài)：僅供研究使用

儲存/穩(wěn)定性：按照指示儲存時，該檢測試劑盒在收到之日起6個月內(nèi)表現(xiàn)最佳。

所需材料但未提供

感興趣的效應(yīng)細胞。

感興趣的靶細胞。

用于細胞培養(yǎng)的U型底96孔板。

T75細胞培養(yǎng)瓶。

結(jié)果示例：

圖：流式細胞術(shù)分析與效應(yīng)PBMCs共孵育的CFSE標(biāo)記NALM-6靶細胞。

將CFSE標(biāo)記的NALM-6細胞與PBMCs以10:1（E:T）的細胞比例共孵育24小時，左側(cè)未添加，右側(cè)添加了抗CD19-抗CD3雙特異性分子（BPS Bioscience #100441），并用7-AAD染色15分鐘。密度圖中的CFSE?/7-AAD?群體對應(yīng)于正在死亡的靶細胞（Q2-2）。