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蛋白 A/G 磁珠

MCE 國(guó)際站：Protein A/G Magnetic Beads

品牌：MedChemExpress (MCE)

貨號(hào)：HY-K0202

中文名稱：蛋白 A/G 磁珠

存儲(chǔ)條件：4°C，2年請(qǐng)勿離心、干燥或冷凍磁珠。

產(chǎn)品活性：蛋白 A/G 磁珠為 IP、Co-IP 和 ChIP 實(shí)驗(yàn)提供了一種快速便捷的方法。

生物活性：蛋白 A/G 磁珠提供了一種利用親和結(jié)合進(jìn)行蛋白質(zhì)磁分離的快速而方便的方法。MCE 蛋白質(zhì) A/G 磁珠通常用于從血清、細(xì)胞培養(yǎng)上清或腹水中分離抗體，以及從細(xì)胞或組織提取物中免疫沉淀和共免疫沉淀抗原。 產(chǎn)品優(yōu)勢(shì) 1. 免疫沉淀時(shí)只需少量磁珠。 2. 方便省時(shí)。 3. 非特異性結(jié)合率低。 4. 樣品損失少。 5. 蛋白質(zhì)結(jié)合能力高達(dá) 0.7 mg/mL。 6. 穩(wěn)定。

描述及優(yōu)勢(shì)：

蛋白 A/G 磁珠提供了一種利用親和結(jié)合進(jìn)行蛋白質(zhì)磁分離的快速而方便的方法。MCE 蛋白質(zhì) A/G 磁珠通常用于從血清、細(xì)胞培養(yǎng)上清或腹水中分離抗體，以及從細(xì)胞或組織提取物中免疫沉淀和共免疫沉淀抗原。

產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)

1. 免疫沉淀時(shí)只需少量磁珠。

2. 方便省時(shí)。

3. 非特異性結(jié)合率低。

4. 樣品損失少。

5. 蛋白質(zhì)結(jié)合能力高達(dá) 0.7 mg/mL。

6. 穩(wěn)定。

操作流程：1. 抗原樣品制備根據(jù)不同的樣品選擇合適的處理方法2. 磁珠預(yù)處理2.1 充分重懸磁珠.2.2 取 25-50 μL 蛋白質(zhì) A/G 磁珠轉(zhuǎn)移到 1.5 mL EP 管中（用量量可根據(jù)需要調(diào)整）。2.3 加入 400 μL 結(jié)合/洗滌緩沖液，充分重懸磁珠。將 EP 管放入磁力架上，磁性分離。棄上清液。重復(fù)此步驟 2 次。3. 抗體與磁珠結(jié)合3.1 使用結(jié)合/洗滌緩沖液將抗體稀釋至終濃度為 5-50 μg/mL 。3.2 將稀釋好的 400 μL 抗體加入步驟 2 處理好的磁珠中，充分混懸，置于翻轉(zhuǎn)混合儀孵育 (室溫，30 mins；4°C，2 hours)。3.3 磁性分離，收集磁珠，上清液收集于新的 EP 管中，以備后續(xù)使用。3.4 加入 400 μL 結(jié)合/洗滌緩沖液，充分混懸磁珠，磁性分離，棄上清；重復(fù)洗滌 4 次。4. 抗原與抗體-磁珠復(fù)合物結(jié)合4.1：加入 400 μL 抗原樣品準(zhǔn)備的抗原樣品，充分混懸，置于翻轉(zhuǎn)混合儀孵育 (室溫，30 mins；4°C，2 hours) ，磁性分離，棄上清。4.2 加入 400 μL 結(jié)合/洗滌緩沖液 充分重懸磁珠，磁性分離，棄上清；重復(fù)洗滌 4 次。5. 抗原洗脫本說明書提供以下兩種抗原洗脫方案，操作者可根據(jù)后期檢測(cè)的需要選擇不同的抗原洗脫方法。a. 變性洗脫法：此方法洗脫的樣品適用于 SDS-PAGE 檢測(cè)。步驟：分離磁珠，棄上清，向磁珠中加入 25-50 μL 1×SDS-PAGE Loading Buffer 混合均勻，95°C 加熱 5 mins。分離磁珠，收集上清，進(jìn)行 SDS-PAGE檢測(cè)。b. 非變性洗脫法：此方法洗脫的樣品保持原有的生物活性，可用于后期功能分析。步驟：分離磁珠，棄上清，向磁珠中加入 25-50 μL 洗脫緩沖液，室溫孵育 10 mins；分離磁珠，收集上清至新的 EP 管，并立即滴入總體積 1/10 體積的中和緩沖液 (0.1 M NaOH)，將洗脫產(chǎn)物 pH 調(diào)節(jié)至中性，樣品用于后期功能分析。注: 本步驟洗脫的抗原為抗原-抗體復(fù)合物，如操作者需要單獨(dú)洗脫目標(biāo)抗原，推薦使用交聯(lián)劑，并按相關(guān)實(shí)驗(yàn)說明操作。

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