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酵母蛋白抽提試劑盒的注意事項(xiàng)有哪些？
1、*次使用酵母蛋白抽提試劑盒前應(yīng)按照試劑瓶標(biāo)簽的說(shuō)明在漂洗液中加入無(wú)水乙醇配制成工作液。
2、溶液YP1在使用前先加入RNaseA，將試劑盒中提供的RNaseA 全部加入，混勻，置于2-8℃保存。
3、質(zhì)粒得率與酵母菌株、質(zhì)?？截悢?shù)、培養(yǎng)條件等因素有關(guān)。通常酵母質(zhì)粒拷貝數(shù)都很低，酵母蛋白抽提試劑盒一般通過(guò)電泳或分光光度計(jì)法都很難檢測(cè)到，可通過(guò)PCR 或轉(zhuǎn)化大腸桿菌來(lái)檢測(cè)。
4、使用前請(qǐng)先檢查溶液YP2和溶液YP3是否出現(xiàn)混濁，如有混濁現(xiàn)象，可在37℃水浴中加熱幾分鐘，待溶液恢復(fù)澄清后再使用。
5、得到的基因組DNA片段的大小與樣品保存時(shí)間、操作過(guò)程中的剪切力等因素有關(guān)。回收得到的DNA片段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)檢測(cè)濃度與純度。如果洗脫時(shí)不使用洗脫緩沖液，而使用去離子水，比值會(huì)偏低，因?yàn)閜H值和離子存在會(huì)影響光吸收值，但并不表示純度低。
6、洗脫緩沖液體積不應(yīng)少于50ul ，體積過(guò)小影響回收效率；洗脫液的 pH值對(duì)洗脫效率也有影響，若需要用水做洗脫液應(yīng)保證其pH 值在8.0左右，可用NaOH 將水的pH 值調(diào)至此范圍，pH 值低于7.0會(huì)降低洗脫效率；酵母蛋白抽提試劑盒在DNA產(chǎn)物應(yīng)保存在-20℃，以防 DNA降解。這種方法針對(duì)雙向電泳，雜質(zhì)少，離子濃度小的特點(diǎn)！當(dāng)然單向電泳也同樣適用，只是電泳的條帶會(huì)減少。
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