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乳酸脫氫酶(LDH)釋放法細(xì)胞繁殖與毒性定量檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

來(lái)源:上海哈靈生物科技有限公司   2016年06月13日 09:41  

         我公司乳酸脫氫酶(LDH)釋放法細(xì)胞繁殖與毒性定量檢測(cè)試劑一種旨在通過(guò)酶聯(lián)連續(xù)反應(yīng)系統(tǒng)檢測(cè)由于細(xì)胞損傷導(dǎo)致的細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定的乳酸脫氫酶釋放到細(xì)胞外,使四唑鹽染料碘硝基氯化四氮唑INT)還原為紅色甲臜(farmazan,即比色法定量測(cè)定酶活性,以評(píng)價(jià)活體細(xì)胞繁殖的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。適用于各種藥物、化學(xué)、環(huán)境因子和營(yíng)養(yǎng)因子處理的貼壁或懸浮生長(zhǎng)中的動(dòng)物或人體細(xì)胞。替代傳統(tǒng)的同位素[51 Cr]釋放檢測(cè)的佳選擇。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,簡(jiǎn)捷敏感,性能穩(wěn)定,顯色清晰,檢測(cè)準(zhǔn)確,重復(fù)性好。

注意事項(xiàng)

1   本產(chǎn)品為100次(1個(gè)96孔板)操作

2   操作時(shí)須戴手套

3   整個(gè)操作須無(wú)菌操作

4   建議每個(gè)樣品安排3個(gè)孔,即重復(fù)3次,計(jì)算時(shí)取其平均值

5   檢測(cè)體系相應(yīng)增加,試劑用量按比例相應(yīng)增加:例如200微升檢測(cè)體系,試劑用量增加1倍

6   每孔中的培養(yǎng)液需100微升,避免使用周邊培養(yǎng)孔(常常液體蒸發(fā)而減少)

7 系統(tǒng)測(cè)試,可以加入10微升標(biāo)準(zhǔn)液(Reagent G)到50微升無(wú)細(xì)胞的細(xì)胞培養(yǎng)液里,然后加入反應(yīng)液和顯色液即可

8   細(xì)胞裂解效果不佳,可以使用20微升裂解液(Reagent A)處理

9   孵育時(shí),須避光

10  染色完成后,建議即刻檢測(cè),遲不得超過(guò)1小時(shí)

11  細(xì)胞培養(yǎng)和處理時(shí),避免使用草酸(OXALATE),草氨酸(OXAMATE)和EDTA,否則影響檢測(cè)的準(zhǔn)確性

12  血清含有乳酸脫氫酶,建議使用濃度不要超過(guò)1%

13  細(xì)胞過(guò)度生長(zhǎng)、密度過(guò)高、離心速度過(guò)大、培養(yǎng)箱內(nèi)外溫差過(guò)大等因素會(huì)造成細(xì)胞自然釋放乳酸脫氫酶

13  酚紅會(huì)干擾檢測(cè)

14  樣品大酶活性對(duì)照孔或大OD吸光讀數(shù)與細(xì)胞裂解程度密切相關(guān)

15  如果用戶(hù)沒(méi)有孔板離心機(jī),則移取上清液時(shí)格外小心

16  如果用戶(hù)沒(méi)有匹配的波長(zhǎng),可以使用波長(zhǎng)470nm至570nm之間的任一波長(zhǎng)

 

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