主要用途

   我公司通用型線粒體DNA損傷超長延展定量PCR擴增分析試劑是一種旨在運用rTth聚合酶XL進行超長延展PCR擴增，產(chǎn)生8.9kb線粒體DNA目標片段，根據(jù)產(chǎn)物量值的差異，來定量分析線粒體DNA損傷程度的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。廣泛應(yīng)用于腫瘤、衰老、毒理作用、DNA修復(fù)等研究。產(chǎn)品即到即用，性能穩(wěn)定，無核酶污染，操作便捷，敏感，重復(fù)性強。

注意事項

• 本產(chǎn)品為20次操作
• 操作時，須戴手套
• 建議使用帶濾芯的槍頭，避免污染
• 在－20℃冰箱里儲存的產(chǎn)品避免反復(fù)凍融
• 建議樣品為純化的線粒體DNA
• 根據(jù)用戶PCR儀的性能，決定是否加入礦物油（Mineral Oil）

• 本產(chǎn)品適合各種熒光定量PCR儀
• 建議整個操作在4℃下進行
• 配制完成后，即刻進行擴增反應(yīng)，以確保反應(yīng)物的活性
• PCR擴增反應(yīng)的初3個循環(huán)為定量基線；3至15個循環(huán)的熒光信號的10倍值為熒光閾值；熒光信號達到閾值所需的循環(huán)數(shù)為Ct值（參考圖像如下)
• Ct值作為端粒酶活性的計量單位
• 用戶可以使用293細胞（10，100，和1000細胞數(shù)）作為陽性對照，以此建立標準曲線：橫座標（X軸）為細胞量對數(shù)，縱座標（Y軸）為Ct值
• 建議選用正常淋巴細胞作為正常對照或校正對照，以此作為評價hTERT的參考指標；用戶可以選用任何其它正常細胞或組織，例如腫瘤組織旁的正常組織等
• 建議選用hTERT陽性表達的MCF7細胞作為陽性對照，以此構(gòu)建標準曲線：縱坐標（Y軸）為Ct值，橫坐標（X軸）為已知細胞量對數(shù)值或拷貝數(shù)或RNA量等，其低有效用量作為樣品檢測量的標準
• 建議使用無模板作為陰性對照
• 內(nèi)參液（Reagent E）為看家基因甘油醛-3-磷酸脫氫酶基因（Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase；GAPDH）作為比較分析時樣品測試用量校正統(tǒng)一的參考標準
• Ct值可以作為hTERT表達的計量單位，也可以根據(jù)標準曲線轉(zhuǎn)換為表達分子數(shù)進行計量
• 本公司提供系列線粒體DNA損傷檢測試劑產(chǎn)品

如:

   通用型線粒體DNA損傷AP位點比色法定量分析試劑盒