一、概述

實時熒光定量 PCR 技術(shù)憑借其靈敏度高、特異性好和結(jié)果可量化的特性，已成為分子生物學及臨床檢測領(lǐng)域的基本工具。隨著科研項目預(yù)算壓力增大和實驗室升級需求增加，二手 qPCR 儀器的市場需求不斷增長。采購二手儀器不僅能有效控制成本，還可在短時間內(nèi)補充實驗通量。本文將對市面上主流品牌及機型進行梳理，并就選購、驗收與維護要點提出參考意見。

二、主流品牌與代表機型

1. Roche（羅氏）

• 主要機型

• LightCycler 96／480 系列

• Cobas Z 480

• 特點簡述

• 兼容 96 孔和 384 孔板，可滿足中低及中高通量需求；

• 溫控均一性與靈敏度檢測經(jīng)多家實驗室驗證；

• 軟件支持多種分析方法，包括 ΔΔCt、標準曲線法、熔解曲線分析和 SNP 分型；

• 可選配梯度模塊與自動化接口。

• 應(yīng)用領(lǐng)域

• 基因表達研究、病原體快速檢測、基因分型、表觀遺傳學等。

2. Thermo Fisher Scientific（熱電/應(yīng)用生物）

• 主要機型

• Applied Biosystems 7500／7500 Fast

• StepOne／StepOne Plus

• QuantStudio 系列（QS 3、QS 5、QS 6、QS 7、QS 12）

• 特點簡述

• 機型覆蓋從低通量到高通量，滿足多種實驗規(guī)模；

• QuantStudio 系列在軟件界面中增加多組學數(shù)據(jù)管理模塊；

• 兼容多種板式，包括 96 孔、384 孔、條管和芯片格式；

• 內(nèi)置快速擴增程序，可在短于 30 分鐘內(nèi)獲取初步定性結(jié)果。

• 應(yīng)用領(lǐng)域

• 臨床診斷、藥物篩選、環(huán)境微生物檢測、食品安全監(jiān)控等。

3. Bio-Rad（伯樂）

• 主要機型

• CFX96 Touch／CFX384 Touch

• CFX Opus 系列

• 特點簡述

• 模塊化設(shè)計，故障時可拆卸更換探測或溫控模塊；

• 數(shù)據(jù)分析軟件支持多維熱圖、3D 聚類等高級可視化；

• 樣本架采用金屬底盤加密封圈設(shè)計，增強溫度傳輸效率；

• 通訊接口包括 USB 與以太網(wǎng)，可接入 LIMS。

• 應(yīng)用領(lǐng)域

• 基因表達定量、拷貝數(shù)變異、SNP 分型、高通量轉(zhuǎn)基因檢測等。

4. Qiagen（凱杰）

• 主要機型

• Rotor-Gene Q／Rotorgene Q MDx

• 特點簡述

• 旋轉(zhuǎn)式樣本架，通過連續(xù)旋轉(zhuǎn)實現(xiàn)孔間溫度均一；

• 適合小體積（≤10 µL）反應(yīng)，可節(jié)省試劑；

• 軟件界面支持熔解曲線和 HRM（高分辨率熔解）分析；

• 設(shè)備體積較小，便于在有限空間內(nèi)部署。

• 應(yīng)用領(lǐng)域

• DNA 甲基化分析、快速病原體檢測、微生物多樣性研究等。

5. Agilent Technologies（安捷倫）

• 主要機型

• AriaMx

• Stratagene Mx3005P

• 特點簡述

• 多通道激發(fā)光源與光電二極管探測器組合；

• 支持 384 孔板格式，并兼容 96 孔和條管模式；

• 軟件包含標準曲線生成、定量 PCR 報告模板和批量導出功能；

• 通訊接口豐富，可實現(xiàn)遠程訪問與數(shù)據(jù)備份。

• 應(yīng)用領(lǐng)域

• 轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品檢測、病毒載量監(jiān)測、基因敲降實驗等。

6. Eppendorf（埃本）

• 主要機型

• Mastercycler ep Realplex／Realplex2

• 特點簡述

• 操作界面簡潔，上手較快；

• 溫控模塊與光學模塊分離設(shè)計，模塊更換方便；

• 支持中通量 96 孔板，部分型號可作梯度 PCR；

• 軟件輸出格式兼容主流文檔與圖像格式。

• 應(yīng)用領(lǐng)域

• 基礎(chǔ)科研、小規(guī)模臨床檢測及教學實驗室等。

7. Takara Bio（塔克拉）

• 主要機型

• TP800／TP9600

• 特點簡述

• 機型針對分子生物學實驗室優(yōu)化，對接多種試劑體系；

• 支持反轉(zhuǎn)錄一體化反應(yīng)和快速 PCR 模式；

• 軟件中內(nèi)置常用引物庫和試劑配方推薦；

• 價格相對合理，性價比與整機維護成本具競爭力。

• 應(yīng)用領(lǐng)域

• miRNA 分析、cDNA 合成后定量、臨床快速篩查等。

8. Analytik Jena（雅納）

• 主要機型

• qTOWER 系列

• 特點簡述

• 提供單板、條管、芯片多種樣本支持方式；

• 用戶可在實驗中實時切換熒光通道；

• 軟件支持批量實驗管理、數(shù)據(jù)歸檔和報告定制；

• 設(shè)備維護簡便，耗材成本控制在合理范圍。

• 應(yīng)用領(lǐng)域

• 環(huán)境監(jiān)測、微生物定量、表觀遺傳學等。

9. 國產(chǎn)及區(qū)域品牌

• Sansure（圣湘）：SLAN-96P／SLAN-384P，主要面向臨床分子診斷市場，支持多重病原體檢測。

• Hengyi（恒逸）：Gentle 96／Gentle 384，聚焦高校及地方檢驗所，提供維護包與質(zhì)控服務(wù)。

• GeneScript（金斯瑞）：部分型號整合核酸提取與 qPCR 功能，適合一站式實驗平臺。

三、選購與驗收要點

成本與預(yù)算考慮

1. 購置費用

• 二手 qPCR 儀器價格受機型、使用年限、配件完整性及保修條款影響，通常為全新設(shè)備的 40%–70%；

• 熱門機型（如 LightCycler 480、CFX96 Touch）因需求量大，二手價格相對穩(wěn)定；

• 區(qū)域品牌及早期型號的折扣幅度更大，但需結(jié)合維護成本一并評估。

2. 運行成本

• 試劑耗材：低漂白孔板與專用封板膜單價較高，若年運行量大，可與耗材供應(yīng)商協(xié)商批量折扣；

• 能耗：實時 qPCR 儀器功耗集中在溫控和光學系統(tǒng)，24 小時待機會增加電費支出；

• 維護保養(yǎng)：定期校準、光源更換及 Peltier 模塊檢修，建議預(yù)留年度維護預(yù)算的 5%–10%。

3. 折舊與殘值

• 實驗室財務(wù)可根據(jù)預(yù)計使用年限（通常為 5 年）線性折舊；

• 維護完好、定期校準的設(shè)備在未來轉(zhuǎn)售時，殘值可保持在購置價的 30% 左右。

4. 綜合評估

• 將購置費、運行成本、維護費和潛在殘值合并計算全生命周期成本（LCC），以便在多款備選機型中做出決策；

• 對于預(yù)算緊張且通量需求中等的實驗室，二手機型與全新中低端機型的 LCC 往往相近，可靈活權(quán)衡。

八、法規(guī)及認證要求

1. 質(zhì)量管理體系

• 實驗室若需通過 ISO 17025、ISO 15189 或 GLP/GMP 認證，二手設(shè)備必須出示最近一次校準報告及維護記錄；

• 建議與賣方簽訂設(shè)備性能保證協(xié)議，明確設(shè)備核心部件的質(zhì)保范圍和響應(yīng)時間。

2. 生物安全和數(shù)據(jù)安全

• 設(shè)備上運行的 qPCR 軟件應(yīng)符合實驗室信息管理系統(tǒng)（LIMS）接口規(guī)范，包含用戶權(quán)限管理與操作日志記錄；

• 如用于病原體檢測，須確保樣本處理區(qū)域與設(shè)備擺放區(qū)域符合生物安全柜操作規(guī)范，避免交叉污染。

3. 軟件與固件合規(guī)

• 二手儀器的軟件授權(quán)需合法轉(zhuǎn)讓，并保證后續(xù)升級與補丁支持；

• 符合國家及地區(qū)的數(shù)據(jù)保護法規(guī)（如 GDPR、HIPAA）要求的數(shù)據(jù)加密與備份機制。

九、未來發(fā)展趨勢

1. 微流控與數(shù)字 PCR 整合

• 越來越多的 qPCR 平臺在設(shè)計時考慮與微流控芯片或數(shù)字 PCR 模塊兼容，以提升靈敏度并降低反應(yīng)體系體積；

• 二手儀器若支持外接芯片模塊，可在常規(guī) qPCR 基礎(chǔ)上開展更精細化的數(shù)字定量研究。

2. 自動化與機器人對接

• 實驗室自動化程度提高，液體處理機器人與 qPCR 儀對接成為常態(tài)；

• 選購二手設(shè)備時，應(yīng)預(yù)留機械臂抓取板架的空間和接口，以減少手動操作誤差。

3. 數(shù)據(jù)分析云端化

• 趨勢向云平臺遷移，數(shù)據(jù)存儲與分析在網(wǎng)絡(luò)環(huán)境下完成；

• 支持云端分析的軟件授權(quán)與網(wǎng)絡(luò)安全合規(guī)將成為二手設(shè)備評估的重要指標。

4. 熒光染料譜系擴展

• 新一代熒光探針和染料不斷推出，能夠?qū)崿F(xiàn)更多重檢測和更低背景信號；

• 二手設(shè)備的濾光片和光源是否可升級或更換，將影響未來實驗拓展能力。

十、結(jié)語

在選購二手實時熒光定量 PCR 儀器時，品牌、機型和核心性能指標只是決策的一部分。結(jié)合實驗室的通量需求、預(yù)算規(guī)劃、維護能力以及未來技術(shù)路線，才能確保設(shè)備在整個使用周期內(nèi)保持穩(wěn)定運行，產(chǎn)出可靠數(shù)據(jù)。通過詳盡的驗收測試和完善的售后協(xié)議，二手 qPCR 儀同樣能夠為基因表達分析、病原體檢測、表觀遺傳學研究等領(lǐng)域提供支持。希望本文對實驗室決策者在二手 qPCR 平臺選型、驗收與維護方面提供具體參考。若有更多具體機型或采購流程方面的問題，歡迎進一步咨詢。