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大鼠E鈣黏蛋白上皮鈣黏蛋白(E-Cad)ELISA試劑盒實驗說明書

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    2025年06月24日
關(guān)鍵詞
標準品,E鈣黏蛋白上皮鈣黏蛋白,標準品,96孔板,ELISA試劑盒
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本生(天津)健康科技有限公司
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資料簡介

  大鼠E鈣黏蛋白上皮鈣黏蛋白(E-Cad)ELISA試劑盒實驗說明書

  以下是天津本生關(guān)于大鼠E鈣黏蛋白/上皮鈣黏蛋白(E-Cad)ELISA試劑盒的實驗說明書要點整理:

  一、實驗原理

  采用雙抗體夾心法:用純化的大鼠E-Cad抗體包被微孔板,依次加入樣本抗原和HRP標記的抗體,形成復合物后通過TMB顯色,顏色深淺與樣本中E-Cad濃度正相關(guān)。

  二、試劑盒組成

  預包被抗體的96孔板

  標準品(通常含400ng/ml凍干品,需用稀釋液重構(gòu))

  生物素標記檢測抗體、HRP標記親和素

  洗滌緩沖液(需蒸餾水稀釋)

  TMB底物溶液及終止液

  三、操作步驟

  樣本準備?

  血清/血漿:離心去除顆粒,避免反復凍融。

  組織勻漿:建議稀釋5,000倍后檢測。

  標準品稀釋?

  按說明書梯度稀釋(如400→200→100→50→25→12.5→6.25 pg/ml),空白孔用稀釋液作為0標準。

  加樣與孵育?

  每孔加50μL標準品或樣本,再依次加入檢測抗體(100μL),37℃孵育60分鐘。

  洗板5次(手工洗板需拍干,避免交叉污染)。

  顯色與終止?

  每孔加底物A/B各50μL,避光反應15分鐘。

  加入終止液后15分鐘內(nèi)測450nm OD值。

  四、注意事項

  樣本處理?:溶血或脂血樣本需離心澄清;細菌污染可能導致假陽性。

  實驗環(huán)境?:避免陽光直射,顯色后需避光。

  質(zhì)量控制?:建議標準品和樣本做復孔,計算平均值。

  保存條件?:開封后未用完板條需密封干燥保存;試劑長期不用需-20℃存放。

  五、結(jié)果計算

  以標準品濃度為橫坐標,OD值為縱坐標繪制曲線,用四參數(shù)擬合方程計算樣本濃度。

  六、技術(shù)參數(shù)

  檢測范圍?:通常為6.25-400 pg/ml(不同品牌可能有差異)。

  靈敏度?:<15 pg/ml。

  特異性?:不與大鼠其他蛋白交叉反應。

  注:以上資料僅供參考,如需完整說明書,建議聯(lián)系供應商獲取隨貨文件。

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