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研域生物技術(shù)（上海）有限公司
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如何清除被污染的細(xì)胞2019/08/05
都知道生物產(chǎn)品都是從細(xì)胞得來(lái)，所以可以說(shuō)細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是生物技術(shù)中zui核心、zui基礎(chǔ)的技術(shù)。在培養(yǎng)細(xì)胞的過(guò)程中，難免會(huì)被污染，一經(jīng)污染，多數(shù)較難處理。如果污染細(xì)胞價(jià)值不大，宜棄之;在尋找原因后*消毒操作室，復(fù)蘇或重新購(gòu)置細(xì)胞，再培養(yǎng)。若污染細(xì)胞價(jià)值較大，又難于重新得到，可采取以下辦法清除。一、細(xì)菌和真菌的清除1、使用抗生素抗生素對(duì)殺滅細(xì)菌較有效。聯(lián)合用藥比單獨(dú)用藥效果好。預(yù)防用藥比污染后再用藥效果好。預(yù)防用藥一般用雙抗生素，污染后清除用藥需采用大于常用量5～10倍的沖洗法，于加藥后作用24～4
免疫組化實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵2019/08/02
*免疫組化實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵是抗體，如果抗體不好，整個(gè)實(shí)驗(yàn)就基本上不會(huì)成功。如何選擇抗體成為免疫組化zui頭疼的問(wèn)題，因?yàn)橐坏?shí)驗(yàn)不成功將浪費(fèi)我們辛苦收集來(lái)的樣本，今天讓上海研域與您分享一下如何選擇抗體這個(gè)問(wèn)題！1、一抗質(zhì)量是酶免疫組化、免疫熒光和Westernblotting等試驗(yàn)中的zui關(guān)鍵因素之一。1）選擇單克隆還是多克隆抗體，前者特異性好，而后者靈敏度高；2）選擇何種種屬來(lái)源？一般兔來(lái)源的多是多克?。欢∈髞?lái)源的多是單克隆，但也有另外。這也決定了你的二抗類型。3）檢測(cè)何種種屬的抗原，即sp
研域技術(shù)教您如何區(qū)分ELISA已加樣孔和未加樣孔2019/07/31
ELISA是免疫學(xué)中常用檢測(cè)方法，加樣時(shí)淡的血清能明顯的區(qū)分哪個(gè)孔加了哪個(gè)孔沒(méi)加。但是有一些項(xiàng)目，需要稀釋血清，稀釋后淡的血清近乎無(wú)色，加樣時(shí)非常容易搞錯(cuò)，很難區(qū)分哪個(gè)孔加過(guò)哪個(gè)孔沒(méi)加過(guò)。下面總結(jié)幾個(gè)小竅門，來(lái)避免加樣出錯(cuò)：1.用一張寫滿字的紙，字越多越好，比如報(bào)紙，墊在下面，這樣，加過(guò)標(biāo)本的小孔看過(guò)去下面的字會(huì)變小，沒(méi)加的字正常，非常容易區(qū)分。2.可以利用液面反光與沒(méi)有加的孔加以區(qū)別。3.在標(biāo)本加完后,再把加樣槍全壓下,使液面產(chǎn)生小氣泡,也可以加以區(qū)分。（注意避免產(chǎn)生氣泡）。4.槍頭一般都是9
移種培養(yǎng)基方法2019/07/29
我們知道培養(yǎng)基它是供微生物、植物和動(dòng)物組織生長(zhǎng)和維持用的人工配制的養(yǎng)料，今日上海研域?yàn)槟恚阂品N培養(yǎng)基方法。半固體培養(yǎng)基移種技術(shù)：用于保存菌種及間接檢查細(xì)菌有無(wú)動(dòng)力。1、材料：半固體培養(yǎng)基、細(xì)菌斜面培養(yǎng)物。2、方法：①將接種針經(jīng)火焰滅菌冷卻后，從斜面培養(yǎng)物表面沾取細(xì)菌。②用無(wú)菌法穿刺接種，將接種針刺入半固體培養(yǎng)基正中央，深度達(dá)距管底0.5cm處停止，然后循原路退出。注意在刺入及拔出時(shí)要保持接種針不向穿刺線外擺動(dòng)。③試管口通過(guò)火焰滅菌，塞上棉塞。接種針經(jīng)火焰滅菌。培養(yǎng)物放37℃恒溫箱中培養(yǎng)。3、
elisa試劑用于各種抗原和抗體測(cè)定2019/07/26
elisa試劑盒用于各種抗原和抗體測(cè)定盒標(biāo)本的影響溶血標(biāo)本及混有紅細(xì)胞的血清采用ELISA法檢測(cè)易產(chǎn)生假陽(yáng)性?？赡苁侨苎逯泻羞^(guò)氧化酶物質(zhì)（紅細(xì)胞或血紅蛋白中的亞鐵血紅素），ELISA試劑盒在洗滌過(guò)程中往往難以*洗脫，它可使H2O2釋放出原生態(tài)氧（O），從而催化底物四甲基聯(lián)苯胺生成可溶性的有色物質(zhì)，即顯藍(lán)色，產(chǎn)生假陽(yáng)性［2］。所以嚴(yán)重溶血標(biāo)本禁用。標(biāo)本受細(xì)菌污染。因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過(guò)氧化物酶，因此，被細(xì)菌污染的標(biāo)本同溶血標(biāo)本一樣，亦可產(chǎn)生非特異性顯色而干擾測(cè)定結(jié)果。標(biāo)本保存不當(dāng)在冰箱
丙酮酸鈉在細(xì)胞培養(yǎng)中的作用2019/07/24
丙酮酸鈉是zui常見(jiàn)的丙酮酸鹽，是一類內(nèi)源性小分子物質(zhì)，丙酮酸鈉和丙酮酸均是天然存在于人體內(nèi)，并參與全身各組織和器官的代謝。丙酮酸鈉在醫(yī)學(xué)上、診斷試劑以及醫(yī)療器械中被廣泛用作緩沖劑、賦形劑和抗氧化劑。此外丙酮酸鈉在細(xì)胞培養(yǎng)中也是常用到的試劑之一，那么丙酮酸鈉在細(xì)胞培養(yǎng)中的作用是什么呢？酮酸鈉在細(xì)胞培養(yǎng)中的作用：丙酮酸鈉在人體日常生活中，是惹你進(jìn)行代謝生命活動(dòng)所必須的，它是一種能量物質(zhì)，在科學(xué)研究進(jìn)行的細(xì)胞培養(yǎng)試驗(yàn)中，科學(xué)研究工作人員還發(fā)現(xiàn)了有作用類似的物質(zhì)，類似參與身體代謝活動(dòng)的為人體提供行動(dòng)的
免疫組化染色必須*抑制活性原因2019/07/22
為何免疫組化染色時(shí)必須*抑制內(nèi)源性過(guò)氧化物酶的活性，才能降低背景的染色？在各種組織中都含有很多的內(nèi)源性過(guò)氧化物酶，尤其在紅細(xì)胞，中性粒細(xì)胞，單核細(xì)胞嗜酸性細(xì)胞，出血的組織壞死的組織等等。含有這種酶的各細(xì)胞和組織如果在染色前不對(duì)其進(jìn)行處理和抑制，它們將會(huì)在DAB底物的顯色時(shí)，與HRP一樣催化底樣，使之顯色，使之生成與陽(yáng)性物一樣的黃棕色，造成混亂。為止，在免疫組化染色前，都必須對(duì)內(nèi)源性過(guò)氧化物酶進(jìn)行抑制。當(dāng)然，對(duì)它們進(jìn)行*的消除是不行的，因?yàn)橐种铺珔柡?，?duì)抗原也會(huì)有相同的抑制作用。氫在抑制內(nèi)源性過(guò)氧
免疫組化方法的優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)2019/07/19
免疫組化方法的優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)一、免疫組化技術(shù)的基本原理應(yīng)用免疫學(xué)及組織化學(xué)原理，對(duì)組織切片或細(xì)胞標(biāo)本中的某些化學(xué)成分進(jìn)行原位的定性、定位或定量研究，這種技術(shù)稱為免疫組織化學(xué)技術(shù)或免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)。*，抗體與抗原之間的結(jié)合具有高度的特異性。免疫組化正是利用這一特性，即先將組織或細(xì)胞中的某些化學(xué)物質(zhì)提取出來(lái)，以其作為抗原或半抗原去免疫小鼠等實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，制備特異性抗體，再用這種抗體(*抗體)作為抗原去免疫動(dòng)物制備第二抗體，并用某種酶(常用辣根過(guò)氧化物酶)或生物素等處理后再與前述抗原成分結(jié)合，將抗原放大，由于
胎牛血清的功能2019/07/17
血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物，其組成成份雖大部分已知，但還有一部分尚不清楚，且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(zhǎng)因子、激素、無(wú)機(jī)物等，這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)或抑制生長(zhǎng)活性是達(dá)到生理平衡的。胎牛血清采用健康母牛懷孕的八月齡胎牛血液為原料，經(jīng)無(wú)菌采集、分離、微孔過(guò)濾后而成。所以胎牛血清是品質(zhì)也是zui高的，因?yàn)樘ヅ＿€未接觸外界，血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞有害的成分zui少。胎牛血清的功能：
研域分析:ELISA試劑盒樣本處理的注意要點(diǎn)2019/07/15
ELISA試劑盒檢測(cè)的樣本是有多種類型的，如血清、血漿、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清或組織勻漿液等，不同類型的檢測(cè)樣本前期的處理方法是不一樣的。實(shí)驗(yàn)樣本的處理可謂是ELISA實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵步驟之一，所以科研朋友一定要多加注意。具體要點(diǎn)那么就由上海研域來(lái)為您分析吧！一、均質(zhì)①組織樣本：肉、肝食品類切細(xì)，用絞肉機(jī)反復(fù)絞碎，混合均勻。②水產(chǎn)樣本：去除樣品的非食用部分，食用部分切細(xì)，用均質(zhì)器均漿；原料表面較臟時(shí),需適當(dāng)用蒸餾水清洗。③蛋類：鮮蛋去殼，蛋黃和蛋白充分混勻。④水果、蔬菜類：先用水洗去泥沙，然后除去表面的水
上海研域與您分享一些關(guān)于抗體的知識(shí)2019/07/12
抗體又稱為免疫球蛋白，是一種由B細(xì)胞分泌，被免疫系統(tǒng)用來(lái)鑒別與中和外來(lái)物質(zhì)如細(xì)菌、病毒等的大型Y形蛋白質(zhì)，僅被發(fā)現(xiàn)存在于脊椎動(dòng)物的血液等體液中，及其B細(xì)胞的細(xì)胞膜表面。那么我們要如何去選購(gòu)抗體呢？首先應(yīng)選擇一家好的生產(chǎn)公司，根據(jù)文獻(xiàn)提供的信息，選擇所需試劑的型號(hào)。1.購(gòu)置抗體的注意事項(xiàng)(1)種屬：?jiǎn)慰寺】贵w，多克隆抗體(2)能否用于石蠟切片(3)稀釋度(4)特異性，叉反應(yīng)(5)用何種組織前處理形式(6)包裝單位，價(jià)格2.抗體的大致分類(1)癌基因與抗癌基因標(biāo)記物；(2)細(xì)胞凋亡標(biāo)記物；(3)各種
細(xì)胞轉(zhuǎn)染樣品的運(yùn)輸保存注意事項(xiàng)2019/07/10
在試驗(yàn)室做細(xì)胞轉(zhuǎn)染時(shí)，樣品的運(yùn)輸保存方法如下：1低溫運(yùn)輸：干冰運(yùn)輸：取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞（細(xì)胞傳代后細(xì)胞匯合度達(dá)到80%時(shí)），用胰蛋白酶把單層生長(zhǎng)的細(xì)胞消化下來(lái)，低速離心1000rpm，5min；棄掉上清（胰蛋白酶及舊的培養(yǎng)液），加入適量配制好的凍存液，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，調(diào)節(jié)凍存液中細(xì)胞的*終密度為5×106/ml～1×107/ml；將細(xì)胞分裝入凍存管中，每管1～1.5ml；在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱、細(xì)胞代次、凍存時(shí)間及操作者；放4℃冰箱30min，-20℃30min到1h
研域細(xì)菌轉(zhuǎn)化的操作步驟2019/07/09
細(xì)菌轉(zhuǎn)化操作步驟（1）事先將恒溫水浴的溫度調(diào)到42℃。（2）從-70℃超低溫冰柜中取出一管（100μl）感受態(tài)菌，立即用手指加溫融化后插入冰上，冰浴5~10min。（3）加入5μl連接好的質(zhì)?；旌弦海―NA含量不超過(guò)100ng），輕輕震蕩后放置冰上20min。（4）輕輕搖勻后插入42℃水浴中1~2min進(jìn)行熱休克，然后迅速放回冰中，靜置3~5min。（5）在超凈工作臺(tái)中向上述各管中分別加入500μlLB培養(yǎng)基（不含抗菌素）輕輕混勻，然后固定到搖床的彈簧架上37℃震蕩1h.（6）在超凈工作臺(tái)中取上
細(xì)胞培養(yǎng)中血清的重要的功能2019/07/05
血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量zui大的天然培養(yǎng)基，含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成份，具有極為重要的功能。1、提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的激素，基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物，以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物。2、提供結(jié)合蛋白，能識(shí)別維生素、脂類、金屬和其他激素等，能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。3、有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合，起到解毒作用。4、是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來(lái)源。5、起酸堿度緩沖液作用。6、提供蛋白酶抑制劑，使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活，保護(hù)細(xì)胞不受傷害。上海研域致
常見(jiàn)蛋白定量的方法2019/07/03
蛋白定量即蛋白質(zhì)定量，蛋白質(zhì)定量根據(jù)其目的看分為全蛋白質(zhì)的"總定量法"和特定蛋白質(zhì)的"個(gè)別定量法"。蛋白定量是生物學(xué)實(shí)驗(yàn)*的一部分。為驗(yàn)證細(xì)胞裂解是否成功，或?yàn)榱藢⒍鄠€(gè)樣品進(jìn)行平行實(shí)驗(yàn)比較或標(biāo)準(zhǔn)化保存，需對(duì)細(xì)胞裂解液進(jìn)行蛋白定量;為了判定蛋白的產(chǎn)量，需對(duì)純化好的蛋白進(jìn)行定量;為了將純化好的蛋白用生物素或者報(bào)告酶進(jìn)行標(biāo)記，同樣需首先對(duì)蛋白樣品進(jìn)行定量，以保證標(biāo)記反應(yīng)在適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)濃度下進(jìn)行。在生化實(shí)驗(yàn)中，對(duì)樣品中的蛋白質(zhì)進(jìn)行準(zhǔn)確可靠的定量分析，是經(jīng)常進(jìn)行的一項(xiàng)非常重要的工作。蛋白定量分析也就涉及到生
實(shí)驗(yàn)中稀釋液不夠了怎么辦？2019/07/01
實(shí)驗(yàn)中稀釋液不夠了怎么辦？沒(méi)有足量的稀釋液去稀釋所有的樣品，怎么辦？不用擔(dān)心，上海研域生物幫你忙！正常情況下，我們所售Elisa試劑盒內(nèi)提供說(shuō)明書(shū)中所的足量的稀釋液。能保證所有的標(biāo)準(zhǔn)品和樣品檢測(cè)兩次。但由于老師實(shí)驗(yàn)問(wèn)題，可能會(huì)浪費(fèi)一部分，對(duì)此我司建議，按照正規(guī)的參數(shù)實(shí)驗(yàn)，如果沒(méi)有推薦的稀釋度，或者需要大量稀釋，請(qǐng)?jiān)趯?shí)驗(yàn)前計(jì)算出所需的稀釋液總量，然后到技術(shù)服務(wù)部門獲取額外的稀釋液。上海研域生物承諾：訂購(gòu)我司Elisa試劑盒，從售前，售中，售后我司均提供技術(shù)服務(wù)，并提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，感謝您對(duì)上海研域
胎牛血清白蛋白如何提取2019/06/28
胎牛血清白蛋白如何提取胎牛血清白蛋白（BSA），是胎牛血清中的一種球蛋白，一般獲取胎牛血清白蛋白，常常運(yùn)用的方法是加熱法。下面一起來(lái)看看是怎樣獲取胎牛血清白蛋白的！一、所需材料胎牛血清取近郊屠宰場(chǎng)，以檸檬酸三鈉為抗凝劑，血液搜集后隨即分別出血漿備用。需要的試劑有血清白蛋白；溴甲酚氯；醋酸纖維素薄膜，別的試劑均為分析純。獲取胎牛血清白蛋白需要準(zhǔn)備LG-6型大容量冷凍離心機(jī)，DF-C型電泳儀，UV-754型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)，PHS-2型酸度計(jì)。二、具體方法白蛋白含量測(cè)定選用溴甲酚氯法，以胎牛血清白
ELISA試劑盒挑選,上海研域有妙招2019/06/26
今天上海研域與您談?wù)勅绾胃鶕?jù)檢測(cè)方法來(lái)選擇ELISA試劑盒，ELISA試劑盒挑選，上海研域有妙招：1.有些客戶會(huì)用OVA(卵清卵白)做一些哮喘，過(guò)敏性腸炎的模型，然后會(huì)檢測(cè)粘膜特異性的sIgA以及血清內(nèi)里IgG，IgE等指標(biāo)。建議做這些檢測(cè)指標(biāo)的朋友，選擇sigma公司V級(jí)別的OVA，然后用這個(gè)來(lái)造模，自己包板摸條件，用OD值來(lái)比較抗體含量的變化。2.ELISA檢測(cè)方法簡(jiǎn)單，靈敏度高，ELISA適合檢測(cè)血清或者培養(yǎng)上清的細(xì)胞因子、胰島素、激素等排泄型的小分子卵白的定量檢測(cè)；病原體抗原的定性與定量
研域分析表面活性劑的結(jié)構(gòu)2019/06/24
很多人只知道表面活性劑廣泛存在于洗發(fā)水，洗衣粉，沐浴露中，但是它的具體結(jié)構(gòu)卻不清楚。不用擔(dān)心，想知道與您生活息息相關(guān)的日用品有哪些表面活性劑結(jié)構(gòu)，請(qǐng)跟隨上海研域生物一起了解下吧。根據(jù)我司多年來(lái)檢測(cè)經(jīng)驗(yàn)。表面活性劑的結(jié)構(gòu)：傳統(tǒng)觀念上認(rèn)為，表面活性劑是一類即使在很低濃度時(shí)也能顯著降低表（界）面張力的物質(zhì)。隨著對(duì)表面活性劑研究的深入，目前一般認(rèn)為只要在較低濃度下能顯著改變表（界）面性質(zhì)或與此相關(guān)、由此派生的性質(zhì)的物質(zhì)，都可以劃歸表面活性劑范疇。無(wú)論何種表面活性劑，其分子結(jié)構(gòu)均由兩部分構(gòu)成。分子的一端為
Elisa標(biāo)準(zhǔn)曲線做不好的原因分析2019/06/21
上周青島農(nóng)業(yè)大學(xué)徐老師在我公司購(gòu)買了相應(yīng)的抗體自己包被Elisa試劑盒。由于徐老師是位實(shí)驗(yàn)新手，剛剛接觸Elisa實(shí)驗(yàn)，研究大鼠干擾素相關(guān)指標(biāo)的實(shí)驗(yàn)，做完大鼠γ干擾素Elisa實(shí)驗(yàn)后反應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)曲線的梯度都不好。剛加完顯色劑的時(shí)候梯度還算明顯，但是顯色比較淺，隨著時(shí)間延長(zhǎng)(大概6、7分鐘)以后梯度就不明顯了。終止反應(yīng)后測(cè)得的值梯度就沒(méi)有了。為此，我公司技術(shù)員對(duì)Elisa標(biāo)準(zhǔn)曲線做不好的原因做出分析：1.剛加完顯色劑時(shí)梯度明顯：顯色液可能是從高濃度向低濃度孔加的。2.酶濃度太高，導(dǎo)致zui后顯色結(jié)果都
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