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2023
03-07

液相色譜柱的異常情況及解決方法
在液相色譜上遇到的問題有很多，例如HPLC色譜柱的一些常見問題時有出現(xiàn)，可能會令很多實驗員感到非常沮喪。那么今天，恒譜生帶您了解這些是什么以及如何解決它們可以讓您避免數(shù)小時的挫敗感。一、無峰值：可能有多種因素會導致HPLC輸出中不出現(xiàn)峰或出現(xiàn)非常小的峰。正常讀數(shù)應該又大又細的峰值，高度也是會有不一樣的。小峰或沒峰可能代表檢測器燈已關閉，沒有流動相流量和樣品丟失或變質，或者檢測器、積分器、進樣器閥或記錄器這些有問題存在。其實先要確保探測器是打開狀態(tài)，然后檢查所有連接情況。確保自動進樣器樣品瓶中有足
2023
02-28

您不可不知的反相 hplc 流動相的選擇
在HPLC中，流動相是純溶劑或混合溶劑以及帶有固體改性劑的溶劑。色譜工作者可以針對HPLC的不同應用在數(shù)百種溶劑中進行選擇。特定的選擇通常受溶劑特性的影響，例如粘度、折射率、非腐蝕性、毒性、混溶性、透明度等。以合理的價格以足夠的純度商業(yè)供應也是重要因素。流動相中的溶劑強度或有機溶劑百分比控制分析物的保留時間。一、什么是流動相？流動相是使分析物通過色譜柱的溶劑。分析物存在于適當?shù)娜軇┲?，在樣品制備后注入色譜系統(tǒng)。該溶劑不被視為新基質，因為它不會干擾分析。可以在樣品制備過程中選擇分析物的載體（溶劑）
2023
02-21

為什么我們要關心色譜柱內徑？
相信很多色譜分析員都知道，改變色譜柱內徑將對許多變量產生直接影響，包括峰高、信噪比、平均柱效、樣品載量、對強注射溶劑的敏感性、壓力、分析物保留次、溶劑用量和/或液體廢物的產生等多方面問題。市面上的液相色譜柱的內徑有4.6毫米、3.0毫米、2.1毫米等等多種選擇，那么，為什么會有這么多內徑規(guī)格呢，下面恒譜生帶您了解。一：內徑對柱色譜有什么影響？在柱色譜法中，樣品物質在流動相的幫助下穿過柱子。它們根據(jù)與固定相的相互作用進行分離，從而產生不同的保留時間。換句話說，可以根據(jù)流動相和固定相之間相互作用的類
2023
02-20

恒譜生通用型反相c18液相色譜柱填料的產品優(yōu)勢
通用型反相C18填料應用廣泛，且通過嚴格的質量控制保證了粒徑的一致性，具有粒徑公布非常窄，全部球形。相對于不規(guī)則色譜填料，由于其高度的同一性，因此其有更高的柱效，更好的裝填重現(xiàn)性和低的壓降，性價比優(yōu)惠的特點，適合在中低壓條件下使用，特別適合天然產物的精細分離。恒譜生提供完整的從分析柱，制備柱到工業(yè)制備色譜填料的一系列產品，有利于產品從研發(fā)到生產的全過程的連續(xù)性。恒譜生USHAC18色譜柱填料，具有高選擇和高分離度的特點，廣泛用于分析極性物質和疏水性物質，是各種化合物的首要選擇。產品優(yōu)勢?填料純度
2023
02-11

高效液相色譜法測定橄欖中的防腐劑
食品防腐劑是能防止由微生物引起的變質，能夠延長食品保質期的一種添加劑，它的主要作用是抑制食品中微生物的繁殖。今天恒譜生就以橄欖的防腐劑為例子給大家講講。一、橄欖果的簡介：橄欖果以兩種形式使用，分別是食用橄欖和油。橄欖果實可以在從成熟開始的任何階段采摘，當它是綠色的時候，直到它變成黑色并成熟，在著色前成熟期間獲得的正常大小的果實稱為“綠橄欖”。天然綠橄欖可以直接浸入鹽水中而無需任何NaOH處理或用堿液處理，由于橄欖表面和加工廠環(huán)境中存在的微生物群的活性或添加發(fā)酵劑的發(fā)酵而發(fā)生自發(fā)發(fā)酵，鹽水的酸性條
2023
02-11

在 hplc 中改變峰分辨率的方法都有哪些呢？
相信很多開發(fā)HPLC方法的實驗研發(fā)人員都開發(fā)出了無法分離混合物重要成分的方法，其方法可以是調整流動相、固定相或柱溫,另一種有效的方法是改變色譜柱粒徑。粒徑較小的液相色譜柱產生較高的塔板數(shù)以獲得更尖銳的峰，并且能夠分離緊密洗脫的峰。一些高分子量化合物在小孔徑填料上可能無法分離，但在用大孔徑填料填充的色譜柱上很容易分離。通常解決緊密或共洗脫峰的有效的方法是改變流動相組成或柱填料顆粒的鍵合相功能。分辨率方程清楚地確定了影響峰分辨率的三個主要因素：其中Rs是兩個靠近洗脫峰的分辨率（間距）；k是代表保留的
2023
01-18

如何選擇合適的色譜柱保護柱？
選擇保護柱的原則是：在滿足分離分析要求的前提條件下，盡可能的選擇較短的保護柱，盡可能選擇對分離樣品保留弱的填料。大多數(shù)色譜工作者是根據(jù)分析柱的填料來選擇保護柱的填料，正常情況下可以選擇與分析柱一樣的色譜填料。但是，根據(jù)實際的分析工作，可不必與分析色譜柱的填料全然匹配。色譜柱通常在選擇保護柱之前首先要考慮樣品是否清潔，對于大部分分析工作來說，一支25px長的保護柱便能夠提供充分的保護作用。但是，如果樣品較臟，或工作中發(fā)現(xiàn)經(jīng)常要更換25px的保護柱，那么就應該選用50px或75px的保護柱。保護柱越
2023
01-16

液相色譜的運作步驟是怎樣的呢
舉個例子問您一個問題，您有沒有試過在濾紙條上放一小點黑色墨水，然后浸在溶劑溶液中的測試？您沒看到墨水是如何開始在紙條上移動并溶解成不同顏色的嗎？其實您完成了這個小實驗，您就已經(jīng)記住了什么是色譜。如果您從事化學工作或研發(fā)類實驗分析等相關領域，您可能遇到過液相色譜。液相色譜法是一種分析技術，可將液體或混合物樣品分離成單獨的純組分。液相色譜技術是準確的，并且由于樣品通過設備暴露于一組物理或化學反應而發(fā)生，樣品經(jīng)過流動相和固定相以達到最終結果一、液相色譜過程涉及哪些步驟，是如何完成的：液相色譜法的分離原
2023
01-14

柱層析方法的介紹你確定不來了解？
柱色譜法是一種常用于分離復雜混合物中分子的方法。與平面色譜不同，在柱色譜中固定相或樹脂被填充到色譜柱中。然后流動相通過填充的固定相以實現(xiàn)分離。這種分離的目的可以是分析性的或制備性的。柱層析在玻璃、塑料或金屬柱內的填充三維固定相上進行，可用于制備和分析目的。柱層析技術包含基于不同固相和液相化學和柱配置的廣泛應用，能夠實現(xiàn)精確分析以及分離難以或不可能通過其他方法分離的復雜混合物。有許多系統(tǒng)可用于液相色譜，系統(tǒng)的選擇取決于所需分離的復雜性。流動相可以通過重力流、使用離心力或使用基于泵的自動系統(tǒng)通過固定
2022
12-31

快看過來！你知道產生鬼峰的原因都有哪些嗎？
快看過來！你知道產生鬼峰的原因都有哪近年來隨著高效液相色譜儀的檢測器靈敏度和色譜柱峰容量的提高，可以在極低濃度下進行檢測，但鬼峰問題卻成為了人們關注的焦點。恒譜生今天就跟大家聊聊鬼峰產生原因和解決措施吧!一、什么是鬼峰：如果化合物出現(xiàn)的時間少于預期的保留時間,則稱為鬼峰”。這將顯示為與注入同一色譜圖的化合物具有不同保留時間的峰。色譜中的鬼峰是在小于預期保留時間的間隔內出現(xiàn)的不需要的峰。這些峰通常是由其他化合物或代謝物與溶劑和固定相的相互作用引|起的,這會導致分離度降低，使評估分離質量變得困難。二
2022
12-26

藥物分析中的高效液相色譜
在高效液相色譜應用的初期，人們認為它會成為氣相色譜的補充方法，然而今天HPLC在藥物分析中幾乎取代了氣相色譜。與其他方法相比，在色譜過程中可能會改變流動極性的液體流動相的應用以及根據(jù)所測試物質的特性對流動相進行的所有其他修改，在分離過程中具有很大的優(yōu)勢。任何藥物的高效液相色譜(HPLC)分析的目的是確認藥物的特性并提供定量結果，以及監(jiān)測疾病治療的進展。還可以用于通過藥物注冊前調查期間的生物醫(yī)學和治療研究，進一步了解人體的正常和疾病過程。生物體液（尤其是血漿、血清或尿液）中藥物和代謝物的分析是高效
2022
12-17

溶劑過濾器在hplc系統(tǒng)中的地位
每個實驗室的色譜分析工作者都很清楚，HPLC分析使用液體作為載體，它將注入的樣品溶液輸送到色譜柱然后輸送到檢測器。這種載體可以是緩沖液與有機溶劑的水-有機混合物、有機-有機混合物。HPLC系統(tǒng)的管道和閥門通道非常狹窄，使用未經(jīng)適當過濾的溶液可能會導致堵塞。通過液相色譜儀運行清潔、無顆粒的HPLC級溶劑是一項基本維護方案。一、對HPLC系統(tǒng)的影響：使用過濾流動相以去除顆粒物質能夠防止導致色譜柱堵塞，色譜柱不僅很昂貴而且被顆粒物堵塞會導致背壓增加或保留時間發(fā)生變化；還能最大限度地減少由于LCMS、U
2022
12-16

C18色譜柱由哪些部件組成？操作時需要注意些什么？
C18色譜柱是一種裝填有固定相用以分離混合組分的柱管，一般為金屬或玻璃制作而成，有直管型、盤管型、U型管等，被廣泛用于多個領域中。色譜柱主要由那些部件組成呢？下面具體介紹一下色譜柱的組成部件，希望可以幫助到大家。色譜是一種分離分析手段，分離是核心，因此擔負分離作用的色譜柱是色譜系統(tǒng)的心臟。對色譜柱的要求是柱效高、選擇性好，分析速度快等。市售的用于HPLC的各種微粒填料如多孔硅膠以及以硅膠為基質的鍵合相、氧化鋁、有機聚合物微球(包括離子交換樹脂)、多孔碳等，其粒度一般為3,5,7,10μm等，柱效
2022
12-09

過濾對高效液相色譜的使用很重要嗎
高效液相色譜是一個需要多個步驟的復雜過程，所有這些步驟都需要無縫地協(xié)同工作才能從樣品中獲得準確且可重復的結果。分析實驗室使用同一臺儀器設備在一定有限的時間內處理大批量樣品和處理不同性質的樣品，樣品類型或樣品制備方法和使用的材料之間的細微差別會影響最終的結果。想要確保過濾裝置中的材料與溶劑之間的相容性可以最大限度地減少問題，這就需要一致的過濾。選擇具有合適孔徑和截留特性的過濾裝置有助于確保有效去除微粒，而選擇合適尺寸和設計的過濾裝置有助于最大限度地減少樣品損失。良好的過濾還有助于保護色譜柱，并可能
2022
12-08

色譜柱篩板的作用與特點，你知道嗎？
色譜柱篩板亦稱多孔板，耐磨性能好、使用壽命長，耐濕、耐磨性能好，適用于洗礦、篩分、分級、脫渣、脫泥、脫水等機械行業(yè)。篩板為長方形、方形、圓形、人字型、棒條型、窄細孔形、長方形、花板型、長圓孔、三角孔、四方孔、梅花孔、貝殼孔、魚鱗孔等各種孔型沖孔篩板。色譜柱篩板的作用與特點：1、聚氨酯彈性體篩板耐磨性能好、使用壽命長，是金屬篩網(wǎng)的十倍多，是普通膠板的3-5倍，是不銹鋼的2-3倍。2、噸礦耗費用低于金屬篩板網(wǎng)。3、耐濕、耐磨性能好。4、吸震降噪、比金屬篩板（網(wǎng)）低10bB倍以上。5、自動清理好，由于
2022
12-03

想要延長hplc色譜柱壽命？先帶您了解液相保護柱吧
一、色譜柱的堵塞：任何來自流動相或樣品的顆粒物質都會污染色譜柱濾網(wǎng)，一些顆粒還可能遷移到柱子填料中，這將導致柱子背壓的增加。這給泵帶來了更大的壓力，并可能導致柱子沉降，產生空隙從而導致峰的分裂。高效液相色譜柱在使用過程中會遇到許多不同的物質，如緩沖液中的鹽或流動相和樣品中的雜質，這些物質可能比被分離的分析物有更少或更多的保留。這些不希望出現(xiàn)的干擾，如果被檢測器觀察到，就會表現(xiàn)為鬼峰、斑點、基線顛倒甚至是負峰。吸收的雜質可能對保留機制產生負面影響（縮短保留）或開始作為新的固定相（增加保留）。HPL
2022
11-26

選擇C18色譜柱時應注意哪些事項？
1)在pH值正常范圍內(2~8)可選用現(xiàn)代高純硅膠色譜柱，具有峰形好，重現(xiàn)性高和壽命長的特點，選用較短的柱子可以提高分離效率，選用較長的柱子可以增加保留，選用小顆粒度的填料可以提高分離度，對分子量大的組分宜選用大孔徑填料的色譜柱。2)分離極性大的組分(流動相水相過大)采用AQ類似的色譜柱。3)分離生物堿類的化合物選用經(jīng)過烷基化處理封口的填料可防止堿性化合物的拖尾現(xiàn)象。4)極端酸性條件下(pH小于2)選用寬pH值色譜柱。5)選用含碳量高的柱子可以增加保留。
2022
11-25

色譜柱可以反沖嗎？
液相色譜對于實驗室分析員來說是容易上手的儀器了，但就算是經(jīng)驗豐富的分析員都會經(jīng)常出現(xiàn)錯誤的操作導致液相色譜儀器發(fā)生故障。而這個時候分析員一般就會選擇把色譜柱進行反沖這個方法，但恒譜生在這里建議分析員在一般情況下還是不要反沖色譜柱，除非色譜柱有特別說明是可以反沖的。那么，哪些柱子不能反向沖洗呢？其實有兩種，一種是兩端柱篩板不一樣是不適合的，因為入口的那一端柱篩板的孔徑比較大會導致固體顆粒物質的堵塞，所以一旦進行反沖就有可能出現(xiàn)造成填料的流失從而導致分析柱的柱效下降的情況；另一種就是色譜分析柱柱頭塌
2022
11-23

來看看正相色譜柱與反相色譜柱的區(qū)別吧
在正相色譜中，一般采用極性鍵合固定相，硅膠表面鍵合的是極性的有機基團，鍵合相的名稱由鍵合上去的基團而定。常用的有氰基(-CN)、氨基(-NH2)、二醇基(DIOL)鍵合相。流動相一般用比鍵合相極性小的非極性或弱極性有機溶劑，如烴類溶劑，或其中加入一定量的極性溶劑(如氯仿、醇、乙腈等)，以調節(jié)流動相的洗脫強度。通常用于分離極性化合物。一般認為正相色譜的分離機制屬于分配色譜。組分的分配比K值，隨其極性的增加而增大，但隨流動相中極性調節(jié)劑的極性增大(或濃度增大)而降低。同時，極性鍵合相的極性越大，組分
2022
11-19

流動相是怎么脫氣的？
溶劑混合時氣泡的形成會導致液相色譜分析中的許多問題，這些問題可以通過對流動相進行脫氣來避免。當溶劑混合時，空氣的溶解度低于同比例的純溶劑，過量的空氣會從溶液中析出/冒泡。脫氣是用來描述溶解氣體從溶液中出來的術語。這種現(xiàn)象也可能發(fā)生在HPLC系統(tǒng)中，其中粗糙的表面會產生氣泡形成的成核位點。由于產生死體積，氣泡還可以改變流動相通過色譜柱的流量。在HPLC分析中，通過對流動相脫氣，可以在很大程度上避免因氣泡形成而產生的問題。一、HPLC系統(tǒng)中的除氣1.低壓混合：低壓混合系統(tǒng)更容易形成氣泡。用于流動相的

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