TNM-FH 培養(yǎng)基
| 參考價(jià) | ￥1-￥620/件 |
- 公司名稱 上海研生實(shí)業(yè)有限公司
- 品牌上研生
- 型號(hào)
- 所在地上海市
- 廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
- 更新時(shí)間2025/7/26 17:28:35
- 訪問次數(shù) 404
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100ml500ml |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | YS-XP10625 | 主要用途 | 科研 |
TNM-FH 培養(yǎng)基
Grace昆蟲培養(yǎng)基（Grace's Insect Medium）最初設(shè)計(jì)為支持澳大利亞白星橙天蠶蛾 (Antherea eucalypti) 細(xì)胞 的生長，是對Wyatt培養(yǎng)基的改良，以更接近 Antherea 血淋巴。Grace用這種培養(yǎng)基建立了第一個(gè)連續(xù)細(xì)胞系。適 當(dāng)補(bǔ)充添加劑后，該基本培養(yǎng)基已用于培養(yǎng)各種昆蟲細(xì)胞，包括多種鱗翅類以及一些雙翅類昆蟲。該培養(yǎng)基主要作為 培養(yǎng)基基礎(chǔ)，用于培養(yǎng)Sf9 和Sf21細(xì)胞系，也用于其它鱗翅類昆蟲細(xì)胞系的生長和維持。
本產(chǎn)品含有多類細(xì)胞培養(yǎng)所需的氨基酸、維生素、無機(jī)鹽等多種成分，但不含蛋白質(zhì)、脂類或任何生長因子，故此產(chǎn)品需搭配血清或無血清添加物使用。
該培養(yǎng)基中含量為350mg/L，是為了與空氣里的二氧化碳起緩沖作用而存在，不足以于5%二氧化碳環(huán)境中達(dá)到平衡，而可以直接于無二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)昆蟲細(xì)胞。為保持本產(chǎn)品的最佳使用效果，請勿進(jìn)行凍融處理。
培養(yǎng)基主要成份表
（-） 酚 紅
（+） 700mg/L D-葡萄糖
（+） 600mg/L L-
（+） 350mg/L NaHCO3
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運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個(gè)月；-20℃，避光，保存6個(gè)月。
1）復(fù)蘇TNM-FH：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查TNM-FH密度。
2）細(xì)胞傳代：如果TNM-FH密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗TNM-FH 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若TNM-FH大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待TNM-FH生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
1.使用TNM-FH時(shí)應(yīng)注意無菌操作，避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗，如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗，可以直接使用。
3.為保持本TNM-FH的優(yōu)良使用效果，不宜將其長時(shí)間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請于保質(zhì)期內(nèi)使用，超出保質(zhì)期，必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用，不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后，可能會(huì)有少量絮狀物析出，不影響TNM-FH正常使用。
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