L-色氨酸的比旋度測定

1 前言

L-色氨酸是人體和動(dòng)物所必需的 8 種必需氨基酸之一，不能通過自身合成，只能通過食物來攝取。L-色氨酸又被稱為第二必需氨基酸，目前廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品、飼料等方面。隨著生產(chǎn)技術(shù)的不斷進(jìn)步，微生物法替代了傳統(tǒng)的化學(xué)合成法和蛋白質(zhì)水解法，占據(jù)了市場主導(dǎo)地位，主要產(chǎn)地集中在歐美、日本等少數(shù)地方。但目前在產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn) L-色氨酸的過程中，均會(huì)存留少量雜質(zhì)，因此下游的分離純化工藝非常重要。

比旋光度是旋光物質(zhì)的重要物理常數(shù)，可以用來檢測 L-色氨酸的純雜程度，進(jìn)而為提升L-色氨酸的生產(chǎn)效率提供參考。

2 儀器與試劑

2.1 儀器

上海佳航--全自動(dòng)旋光儀Digipol-P630

3 實(shí)驗(yàn)方法

3.1 實(shí)驗(yàn)步驟

（1） 色氨酸溶液

稱取約 1.0g 色氨酸，加入適量水，在水浴（60℃）中溫?zé)崛芙?，定容?100mL， 制成每 1 mL 約含 10mg 的溶液。

（2） 空白測試

將控溫旋光管用三級(jí)水清洗 3 次以上，然后加滿水至管路中無氣泡。將旋光管水平放置于旋光儀中，連接溫控線，設(shè)置溫度 20℃，等待儀器溫度穩(wěn)定后，點(diǎn)擊“清零”。

（3） 樣品測試

將控溫旋光管取出，用色氨酸溶液清洗 3 次以上，然后加滿溶液至管路中無氣泡。等待儀器溫度穩(wěn)定后，點(diǎn)擊“測試”。

3.2 儀器參數(shù)

4 結(jié)果與討論

4.1 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

4.2 討論

兩次平行的結(jié)果均符合藥典中對(duì)于 L-色氨酸比旋度的要求(-30.0°~-32.5°)，此實(shí)驗(yàn)?zāi)軌?/span>為L-色氨酸的純度測定提供一定的依據(jù)。

參考文獻(xiàn)

[1] 陳榮慶,劉偉,等.L-色氨酸的研究進(jìn)展[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2014,(14):4438-4440,4443.

[2] 國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典[M].二部.北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2015:388.

注意事項(xiàng)

1、本次實(shí)驗(yàn)所用試劑和水，在沒有注明其他要求時(shí)，均指分析純?cè)噭┖腿?jí)水。

2、色氨酸略溶于水（1.1g/100mL，25℃），建議在水浴中溫?zé)崛芙?。建議先加入 50-60 mL 的水，攪拌溶解大部分樣品，再添加少量水至樣品全部溶解，再于冰水中冷卻至 20℃。后將樣品液和清洗液全部轉(zhuǎn)移至 100mL 容量瓶中，定容。也可使用超聲波儀器加速溶解。

3、溶液配制好后建議在 30min 內(nèi)測試完畢。

4、可通過旋光管兩側(cè)的透光玻璃孔觀察管中是否有氣泡，同時(shí)檢查并擦凈玻璃上的水漬和污跡。

5、為旋光管更換樣品液時(shí)建議將儀器的溫控關(guān)閉。操作方法是將參數(shù)設(shè)置里的“溫度” 選項(xiàng)關(guān)閉。

• 全自動(dòng)數(shù)字旋光計(jì)

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