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目錄:上海乾思生物科技有限公司>>細(xì)胞>>細(xì)胞系>> BY-1333CHO-NIDVD中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢癌細(xì)胞系

CHO-NIDVD中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢癌細(xì)胞系

  • CHO-NIDVD中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢癌細(xì)胞系
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CHO-NIDVD中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢癌細(xì)胞系,上皮樣,貼壁生長(zhǎng),惡性表型穩(wěn)定,高表達(dá) NIDVD 相關(guān)標(biāo)志物,適用于卵巢癌發(fā)病機(jī)制研究、抗癌藥物篩選及腫瘤模型構(gòu)建,應(yīng)用前景廣闊。
CHO-NIDVD中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢癌細(xì)胞系
CHO-NIDVD中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢癌細(xì)胞系是 CHO 細(xì)胞家族中具有特異性腫瘤表型的亞株,因穩(wěn)定高表達(dá) NIDVD 相關(guān)標(biāo)志物且保留卵巢癌惡性特征,成為卵巢癌 NIDVD 通路機(jī)制研究與靶向藥物開(kāi)發(fā)的特色模型。其在 CHO 細(xì)胞遺傳背景清晰的基礎(chǔ)上,賦予了 NIDVD 相關(guān)功能研究的特異性,為解析該標(biāo)志物在卵巢癌發(fā)生發(fā)展中的作用提供了精準(zhǔn)工具。
一、細(xì)胞來(lái)源與基本特性
  • 來(lái)源與表型:該細(xì)胞系源自經(jīng) NIDVD 通路激活誘導(dǎo)的 CHO 細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化株,經(jīng)單克隆篩選獲得穩(wěn)定表達(dá) NIDVD 相關(guān)標(biāo)志物的細(xì)胞群體,“NIDVD" 明確標(biāo)識(shí)其功能特征,與普通卵巢癌細(xì)胞系形成區(qū)分。其保留卵巢上皮細(xì)胞的部分形態(tài)特征,同時(shí)呈現(xiàn)典型惡性表型:無(wú)接觸抑制,錨定非依賴性生長(zhǎng)能力強(qiáng)(軟瓊脂克隆形成率>35%),裸鼠皮下接種成瘤率 100%,腫瘤生長(zhǎng)速率快于普通 CHO 衍生癌細(xì)胞系,完整模擬 NIDVD 高表達(dá)型卵巢癌的臨床特征。

  • 形態(tài)與增殖:體外培養(yǎng)呈上皮樣為主,少量梭形細(xì)胞混雜,貼壁生長(zhǎng),細(xì)胞排列密集且紊亂,核質(zhì)比顯著升高,可見(jiàn)異常核分裂象。在 37℃、5% CO?條件下,增殖活躍,傳代周期約 22-28 小時(shí),可適應(yīng)含 10% 胎牛血清的 DMEM/F12 培養(yǎng)基,無(wú)需特殊生長(zhǎng)因子,傳代 80 次以上仍能維持 NIDVD 標(biāo)志物高表達(dá)及惡性表型穩(wěn)定,優(yōu)于原代 NIDVD 陽(yáng)性卵巢癌細(xì)胞。

  • 遺傳特征:核型為亞二倍體,染色體數(shù)目 39-43 條,存在 NIDVD 相關(guān)基因所在染色體區(qū)域的擴(kuò)增(如熒光原位雜交檢測(cè)顯示拷貝數(shù)增加),長(zhǎng)期傳代后核型變異率<6%。其核心特征是 NIDVD 相關(guān)標(biāo)志物(如特定蛋白、轉(zhuǎn)錄本)表達(dá)量為普通 CHO 細(xì)胞的 10-15 倍(通過(guò) qPCR 與 Western blot 驗(yàn)證),且持續(xù)激活 NIDVD 下游信號(hào)通路(如細(xì)胞周期調(diào)控通路、凋亡抑制通路)。

二、核心應(yīng)用領(lǐng)域
  1. NIDVD 標(biāo)志物功能機(jī)制研究

該細(xì)胞系是解析 NIDVD 相關(guān)標(biāo)志物在卵巢癌中作用的關(guān)鍵模型。通過(guò) CRISPR/Cas9 技術(shù)敲除 NIDVD 相關(guān)基因,可對(duì)比分析細(xì)胞增殖、侵襲能力的變化(如 Transwell 穿膜細(xì)胞數(shù)下降 40%-60%),明確其是否為卵巢癌驅(qū)動(dòng)因子;或通過(guò)共免疫沉淀篩選該標(biāo)志物的相互作用蛋白,構(gòu)建 NIDVD 參與的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。例如,在研究 NIDVD 標(biāo)志物與細(xì)胞凋亡的關(guān)聯(lián)時(shí),其能穩(wěn)定呈現(xiàn)標(biāo)志物高表達(dá)狀態(tài)下抗凋亡蛋白 Bcl-2 的上調(diào)及細(xì)胞對(duì)凋亡誘導(dǎo)劑的抵抗性增強(qiáng)。
  1. NIDVD 靶向藥物篩選與評(píng)估

因高表達(dá) NIDVD 相關(guān)標(biāo)志物,該細(xì)胞系成為該靶點(diǎn)藥物的專屬篩選工具。通過(guò)高通量篩選可快速評(píng)估化合物對(duì) NIDVD 標(biāo)志物表達(dá)或活性的抑制效果,結(jié)合細(xì)胞活力檢測(cè)(如 CCK-8 法)確定半數(shù)抑制濃度(IC50);其耐藥亞株(經(jīng)藥物誘導(dǎo)獲得)可用于研究 NIDVD 通路介導(dǎo)的耐藥機(jī)制,如檢測(cè)標(biāo)志物表達(dá)變化與藥物外排泵活性的關(guān)聯(lián)。篩選結(jié)果重復(fù)性高(變異系數(shù)<5%),為 NIDVD 靶向藥物開(kāi)發(fā)提供可靠數(shù)據(jù)。
  1. 腫瘤微環(huán)境與 NIDVD 交互作用研究

該細(xì)胞系可模擬 NIDVD 高表達(dá)型卵巢癌與微環(huán)境的相互作用。通過(guò)與腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞共培養(yǎng),可觀察 NIDVD 標(biāo)志物對(duì)微環(huán)境細(xì)胞因子(如 TGF-β、IL-8)分泌的調(diào)控,解析其促進(jìn)腫瘤基質(zhì)形成的機(jī)制;或通過(guò) 3D 腫瘤球體模型,研究 NIDVD 高表達(dá)對(duì)腫瘤缺氧耐受、血管生成能力的影響(如 VEGF 分泌量增加 2-3 倍),為開(kāi)發(fā)聯(lián)合靶向 NIDVD 與微環(huán)境的治療策略提供依據(jù)。
三、優(yōu)勢(shì)與局限性
  • 優(yōu)勢(shì):NIDVD 相關(guān)標(biāo)志物表達(dá)穩(wěn)定,功能特異性強(qiáng),避免普通細(xì)胞系研究中的靶點(diǎn)干擾;遺傳背景與 CHO 細(xì)胞高度同源,便于通過(guò)親本細(xì)胞對(duì)照解析 NIDVD 通路的獨(dú)立作用;培養(yǎng)條件簡(jiǎn)單,可實(shí)現(xiàn)大規(guī)模擴(kuò)增,滿足高通量藥物篩選需求;體內(nèi)外成瘤特性與臨床 NIDVD 高表達(dá)型卵巢癌相似,實(shí)驗(yàn)結(jié)果轉(zhuǎn)化價(jià)值高。

  • 局限性:源自倉(cāng)鼠細(xì)胞,NIDVD 通路部分調(diào)控機(jī)制與人類存在物種差異,結(jié)果外推需結(jié)合人源細(xì)胞系驗(yàn)證;缺乏卵巢癌的天然異質(zhì)性,難以模擬臨床腫瘤的復(fù)雜亞型;長(zhǎng)期培養(yǎng)可能出現(xiàn) NIDVD 表達(dá)量輕微下降,需定期通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)監(jiān)測(cè)標(biāo)志物陽(yáng)性率。

四、培養(yǎng)與實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)
  • 培養(yǎng)條件:常規(guī)使用含 10% 胎牛血清的 DMEM/F12 培養(yǎng)基,添加適宜試劑預(yù)防污染,傳代時(shí)采用溫和方法分離細(xì)胞,避免機(jī)械損傷導(dǎo)致表型改變。維持細(xì)胞融合度在 40%-70%,過(guò)度密集可能導(dǎo)致 NIDVD 標(biāo)志物表達(dá)波動(dòng)。

  • 質(zhì)控與安全:定期通過(guò) qPCR 與 Western blot 驗(yàn)證 NIDVD 標(biāo)志物表達(dá)量,軟瓊脂實(shí)驗(yàn)監(jiān)測(cè)惡性表型穩(wěn)定性;STR 鑒定確保細(xì)胞純度,避免交叉污染。因具有致瘤性,操作需符合生物安全二級(jí)標(biāo)準(zhǔn),凍存使用含 10% DMSO 的wan全培養(yǎng)基,液氮保存可維持活性 5 年以上。

五、研究意義

CHO-NIDVD 細(xì)胞系的建立填bu了卵巢癌 NIDVD 特異性研究模型的空白,為該標(biāo)志物的功能解析與臨床轉(zhuǎn)化搭建了橋梁。在基礎(chǔ)研究中,其助力闡明 NIDVD 通路在卵巢癌發(fā)生、耐藥中的作用機(jī)制,為發(fā)現(xiàn)新治療靶點(diǎn)提供線索;在應(yīng)用領(lǐng)域,其加速了 NIDVD 靶向藥物的篩選與開(kāi)發(fā),尤其對(duì) NIDVD 高表達(dá)型卵巢癌的精準(zhǔn)治療具有重要推動(dòng)作用。隨著類器官技術(shù)的結(jié)合,該細(xì)胞系有望更精準(zhǔn)模擬體內(nèi)腫瘤微環(huán)境,進(jìn)一步提升研究的臨床相關(guān)性。

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