來源與形態(tài)：BHK-21 細胞于 1961 年首ci從 1 日齡敘利亞倉鼠的腎臟組織中分離獲得，經(jīng)傳代篩選后形成穩(wěn)定細胞系。體外培養(yǎng)時呈成纖維樣形態(tài)，貼壁生長，細胞呈長梭形或星形，排列疏松，具有良好的延展性。在 37℃、5% CO?的恒溫培養(yǎng)環(huán)境中，增殖速度快，傳代周期約 1-2 天，可長期傳代且保持穩(wěn)定活性，同時支持貼壁培養(yǎng)向懸浮培養(yǎng)的馴化，適應規(guī)?；a(chǎn)需求。

遺傳特征：該細胞系為永生細胞系，核型呈非整倍體，染色體數(shù)目約 44-46 條，核型穩(wěn)定且無內(nèi)源性病毒污染。其基因組背景清晰，對外源基因的容納能力較強，轉(zhuǎn)染后可高效表達目標產(chǎn)物。此外，細胞對多種營養(yǎng)成分的需求簡單，無需復雜的生長因子補充，這一特性使其在基礎研究與工業(yè)生產(chǎn)中均易于操作。

優(yōu)勢：培養(yǎng)條件簡單，對培養(yǎng)基成分要求低，可適應含血清或無血清培養(yǎng)體系；病毒敏感性高，能支持多種病毒的完整復制周期，且病毒增殖效率遠超其他細胞系；增殖速度快，可通過懸浮培養(yǎng)實現(xiàn)規(guī)?；a(chǎn)，滿足工業(yè)化需求；細胞遺傳穩(wěn)定性強，長期傳代后仍保持一致的生物學特性，實驗重復性好，被世界衛(wèi)生組織（WHO）推薦為疫苗生產(chǎn)的標準細胞系之一。

局限性：作為動物細胞系，其對部分人類病毒（如肝炎病毒）的敏感性較低，應用范圍存在一定限制；長期傳代可能導致細胞形態(tài)變異或病毒敏感性下降，需通過定期凍存原始細胞株來維持穩(wěn)定性；懸浮培養(yǎng)時易出現(xiàn)細胞聚集體，可能影響病毒或蛋白的均一性生產(chǎn)。

培養(yǎng)條件：常規(guī)使用含 10% 胎牛血清的 MEM 或 DMEM 培養(yǎng)基，添加青mei素 - 鏈mei素混合液抑制細菌污染。若用于大規(guī)模病毒培養(yǎng)，可采用旋轉(zhuǎn)瓶或生物反應器進行懸浮培養(yǎng)，配合無血清培養(yǎng)基減少外源蛋白干擾，便于后續(xù)純化。培養(yǎng)過程中需控制細胞密度（貼壁培養(yǎng)融合度不超過 80%），避免過度密集導致細胞形態(tài)改變或增殖停滯。

污染防控：貼壁細胞易受支原體、真菌污染，需定期通過 PCR 或熒光染色法檢測；凍存時需加入 10% 二甲基亞砜（DMSO）作為保護劑，在液氮中可長期保存，復蘇時 37℃水浴快速解凍，離心去除 DMSO 以減少細胞損傷。