來源與形態(tài)：該亞株源自 CHO-K1 細(xì)胞系，經(jīng)單細(xì)胞克隆或基因編輯技術(shù)篩選獲得。體外培養(yǎng)時呈典型上皮樣形態(tài)，貼壁生長，細(xì)胞呈多邊形，排列緊密且邊界清晰，較母系細(xì)胞形態(tài)更均一。在 37℃、5% CO?的培養(yǎng)條件下，增殖穩(wěn)定，傳代周期約 2-3 天，可適應(yīng)貼壁培養(yǎng)、懸浮培養(yǎng)及無血清培養(yǎng)基體系，高密度培養(yǎng)時細(xì)胞狀態(tài)仍能保持穩(wěn)定。

遺傳特征：核型為非整倍體，染色體數(shù)目約 20-22 條，核型穩(wěn)定性優(yōu)于母系細(xì)胞，基因組背景清晰，無內(nèi)源性病毒序列。部分亞株通過基因改造，缺失了特定代謝相關(guān)基因或引入抗性標(biāo)記，更便于外源基因的篩選與穩(wěn)定表達(dá)，長期傳代后仍能維持目標(biāo)蛋白的表達(dá)穩(wěn)定性。

優(yōu)勢：遺傳穩(wěn)定性高，實(shí)驗(yàn)重復(fù)性好，能保證長期研究結(jié)果的一致性；蛋白表達(dá)效率優(yōu)異，翻譯后修飾能力強(qiáng)，產(chǎn)物活性接近天然蛋白；培養(yǎng)適應(yīng)性強(qiáng)，可在多種培養(yǎng)體系中生長，易于工業(yè)化放大；被國際監(jiān)管機(jī)構(gòu)認(rèn)可，是生物藥生產(chǎn)的合規(guī)細(xì)胞系，應(yīng)用范圍廣泛。

局限性：部分亞株對特定營養(yǎng)成分有特殊需求，增加了培養(yǎng)成本；長期懸浮培養(yǎng)可能出現(xiàn)細(xì)胞聚集體，影響蛋白產(chǎn)量與質(zhì)量；對于某些結(jié)構(gòu)異常復(fù)雜的蛋白，表達(dá)量可能較低，需進(jìn)一步優(yōu)化培養(yǎng)條件或進(jìn)行細(xì)胞改造。

培養(yǎng)條件：常規(guī)使用含 10% 胎牛血清的 DMEM/F12 培養(yǎng)基，添加青mei素 - 鏈mei素預(yù)防污染。若用于大規(guī)模生產(chǎn)，可采用無血清懸浮培養(yǎng)基，并根據(jù)亞株特性調(diào)整營養(yǎng)成分。培養(yǎng)過程中需控制細(xì)胞密度，貼壁培養(yǎng)時融合度不宜超過 85%，懸浮培養(yǎng)時密度保持在適宜范圍，避免過度密集影響細(xì)胞狀態(tài)。

污染防控：需定期檢測支原體、細(xì)菌等污染，可采用 PCR 或染色法進(jìn)行監(jiān)測。凍存時使用含 10% DMSO 的凍存液，在液氮中長期保存，復(fù)蘇時 37℃水浴快速解凍，離心去除 DMSO 以減少細(xì)胞損傷，復(fù)蘇后建議傳代 1-2 次，待細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定后再用于實(shí)驗(yàn)。