目錄:上海乾思生物科技有限公司>>細胞>>細胞系>> BY-1305CHO-K1中國倉鼠卵巢細胞系亞株
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來源與形態(tài):該亞株源自 CHO-K1 細胞系,通過單細胞克隆、抗性篩選或基因編輯技術獲得,純度與均一性顯著優(yōu)于母系。體外培養(yǎng)時呈典型上皮樣形態(tài),貼壁生長,細胞呈多邊形,排列緊密且邊界清晰,形態(tài)一致性高,無明顯異質(zhì)性。在 37℃、5% CO?的培養(yǎng)環(huán)境中,增殖穩(wěn)定,傳代周期約 2-3 天,可適應貼壁培養(yǎng)、懸浮培養(yǎng)及無血清培養(yǎng)基體系,高密度培養(yǎng)時細胞存活率仍能保持在 90% 以上。
遺傳特征:核型為非整倍體,染色體數(shù)目約 20-22 條,核型穩(wěn)定性優(yōu)于母系細胞,長期傳代后仍能維持基因組的一致性。部分亞株通過基因改造引入特定特性,如缺失特定代謝基因(便于篩選)或整合抗性標記(利于外源基因穩(wěn)定表達),基因組背景清晰,對外源基因的容納能力強,轉(zhuǎn)染后可高效表達目標蛋白。
重組蛋白高效表達
基因工程與功能研究
藥物篩選與毒性評估
優(yōu)勢:遺傳均一性高,實驗重復性好,批間差異?。坏鞍妆磉_效率高且穩(wěn)定,翻譯后修飾能力優(yōu)異,產(chǎn)物生物活性強;培養(yǎng)適應性廣,可在多種培養(yǎng)體系中高效增殖,便于實驗室研究與工業(yè)化生產(chǎn)銜接;被 FDA、EMA 等國際監(jiān)管機構認可,是生物藥生產(chǎn)的合規(guī)細胞系,應用范圍覆蓋從基礎研究到商業(yè)化生產(chǎn)的全鏈條。
局限性:部分亞株因基因改造可能對特定營養(yǎng)成分有依賴(如缺失某代謝基因需外源補充),增加培養(yǎng)成本;懸浮培養(yǎng)時易形成小聚集體(直徑通常<100μm),可能影響蛋白分泌的均一性;與人類細胞的糖基化模式仍存在細微差異,少數(shù)蛋白的體內(nèi)活性可能受影響,需通過培養(yǎng)基優(yōu)化或基因編輯進一步改良。
培養(yǎng)條件:常規(guī)使用含 10% 胎牛血清的 DMEM/F12 培養(yǎng)基,添加青mei素 - 鏈mei素預防污染。生產(chǎn)階段多采用化學成分明確的無血清培養(yǎng)基,減少外源因子干擾,提升產(chǎn)物純度。培養(yǎng)過程中需控制溶氧(30%-50% 飽和度)、pH(7.2-7.4)及葡萄糖濃度(2-4g/L),避免營養(yǎng)耗竭或代謝廢物積累。
污染防控:貼壁細胞易受支原體污染,需每周通過 PCR 檢測;凍存時使用含 10% DMSO 的凍存液,梯度降溫后保存于液氮中,復蘇時 37℃快速解凍,離心去除 DMSO 以減少細胞損傷,復蘇后傳代 1-2 次,待細胞狀態(tài)穩(wěn)定后再用于實驗。
CHO-K1 亞株的出現(xiàn)推動了生物制藥的精準化與高效化:其均一性解決了母系細胞異質(zhì)性導致的實驗誤差問題,為重組蛋白生產(chǎn)的標準化提供了保障;基因改造技術的融入使其能滿足特定需求(如高表達某類蛋白),拓展了應用場景。目前,全球 60% 以上的重組蛋白藥物由該亞株或其衍生株生產(chǎn),其技術原理也為其他細胞系的優(yōu)化提供了范式,成為連接基礎研究與產(chǎn)業(yè)化的關鍵橋梁,持續(xù)推動生物藥向高效、安全、低成本方向發(fā)展。
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