腎臟特異性標(biāo)志物與轉(zhuǎn)運(yùn)功能：高表達(dá)腎上皮細(xì)胞特異性標(biāo)志物，如細(xì)胞角蛋白 19（CK19，陽性率 98%）、鈉鉀泵 α1 亞基（Na?/K?-ATPase，陽性率 95%），其 Na?/K?-ATPase 活性達(dá) 12μmol Pi/mg 蛋白 /h（顯著高于 PNH/HL-059）；能通過腎小管樣結(jié)構(gòu)完成水和電解質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)，模擬腎臟的重吸收功能，與豬腎皮質(zhì)組織的功能一致性達(dá) 85%。

病毒受體廣譜表達(dá)：表達(dá)多種豬源病毒受體，如豬瘟病毒受體 CD46（陽性率 92%）、豬圓環(huán)病毒受體硫酸乙酰肝素（陽性率 94%），受體譜覆蓋 70% 以上的常見豬源病毒；對(duì) PCV2 的受體結(jié)合效率是 PNH/HL-059 的 5 倍，為病毒高效感染提供分子基礎(chǔ)。

病毒復(fù)制支持能力：對(duì) PCV2 的感染效率達(dá) 97%，病毒滴度可達(dá) 10?.? TCID??/mL（顯著高于 PNH/HL-059 的 10?.? TCID??/mL）；對(duì)豬瘟病毒的復(fù)制效率居豬源細(xì)胞系前列，48 小時(shí)病毒滴度達(dá) 10?.? TCID??/mL，且能穩(wěn)定產(chǎn)生典型空斑，是該病毒空斑實(shí)驗(yàn)的金標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞系。

臨床樣本檢測(cè)：作為豬圓環(huán)病毒分離的shou選細(xì)胞系，PK-15 從臨床腎臟樣本中的病毒分離率達(dá) 93%（PNH/HL-059 僅 55%），且 24 小時(shí)內(nèi)即可觀察到典型細(xì)胞病變（胞質(zhì)內(nèi)包涵體），我國(guó)基層獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室廣泛將其用于 PCV2 相關(guān)疾病的快速確診。

病毒分型研究：利用其對(duì)豬瘟病毒不同亞型的敏感性差異，可通過病毒增殖動(dòng)力學(xué)區(qū)分強(qiáng)毒與弱毒株（強(qiáng)毒株滴度是弱毒株的 10 倍），為病毒毒力評(píng)估提供直觀依據(jù)，該方法被 OIE 納入標(biāo)準(zhǔn)操作程序。

常規(guī)疫苗生產(chǎn)：在豬瘟滅活疫苗生產(chǎn)中，PK-15 細(xì)胞的病毒產(chǎn)量達(dá) 10?.2 TCID??/mL，單位面積產(chǎn)量是 PNH/HL-059 的 2.5 倍，且生產(chǎn)成本降低 40%（無需專用肝細(xì)胞培養(yǎng)基）；全球 80% 以上的豬瘟疫苗采用該細(xì)胞系生產(chǎn)，累計(jì)應(yīng)用超 60 年。

疫苗效力檢測(cè)：作為豬圓環(huán)病毒疫苗批簽發(fā)的標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞系，其病毒中和試驗(yàn)結(jié)果與仔豬攻毒保護(hù)率一致性達(dá) 91%，檢測(cè)成本僅為動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的 1/6，且耗時(shí)從 28 天縮短至 72 小時(shí)，大幅提升疫苗質(zhì)量控制效率。

病毒致腎損傷模型：通過該細(xì)胞系研究 PCV2 對(duì)腎臟的損傷機(jī)制，發(fā)現(xiàn)病毒可誘導(dǎo)腎上皮細(xì)胞凋亡（凋亡率達(dá) 50%），并抑制 Na?/K?-ATPase 活性（下降 60%），導(dǎo)致水鈉代謝紊亂，與 PCV2 感染仔豬的腎炎病理變化一致性達(dá) 90%（PNH/HL-059 模型無法模擬）。

腎毒性藥物篩選：建立基于腎臟轉(zhuǎn)運(yùn)功能的藥物毒性評(píng)價(jià)模型，某抗生素在該模型中顯示腎毒性（Na?/K?-ATPase 活性下降 45%），與仔豬腎臟組織損傷結(jié)果的相關(guān)性達(dá) 88%，顯著優(yōu)于肝細(xì)胞系模型。

培養(yǎng)基：MEM 培養(yǎng)基添加 10% 胎牛血清，pH 維持在 7.2-7.4；低成本培養(yǎng)可使用 5% 新生牛血清替代，細(xì)胞活性保持 90% 以上，病毒產(chǎn)量下降不超過 8%，適合工業(yè)化生產(chǎn)。

傳代流程：當(dāng)細(xì)胞融合度達(dá) 80% 時(shí)，按 1:5 比例接種（高于 PNH/HL-059 的 1:2 比例），離心速度 800rpm，24 小時(shí)貼壁率超 95%，操作簡(jiǎn)便性優(yōu)于肝細(xì)胞系。

凍存保護(hù)：采用含 10% DMSO 的wan全培養(yǎng)基，細(xì)胞密度 1.5×10?個(gè) /mL，-80℃凍存可保存 6 個(gè)月（存活率＞90%），液氮保存可達(dá) 5 年以上，復(fù)蘇后 24 小時(shí)即可恢復(fù)正常增殖。

豬圓環(huán)病毒培養(yǎng)：細(xì)胞以 2×10?個(gè) / 孔接種 24 孔板，培養(yǎng) 24 小時(shí)后接種病毒（MOI=0.01），37℃培養(yǎng) 72 小時(shí)，通過實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 檢測(cè)病毒拷貝數(shù)（可達(dá) 10? copies/mL），結(jié)果變異系數(shù)＜5%。

空斑實(shí)驗(yàn)優(yōu)化：細(xì)胞單層接種 6 孔板，病毒 10 倍系列稀釋后吸附 1 小時(shí)，覆蓋含 1% 瓊脂糖的維持液，72 小時(shí)后結(jié)晶紫染色計(jì)數(shù)空斑，空斑形成單位（PFU）檢測(cè)靈敏度達(dá) 10?.? PFU/mL。

優(yōu)勢(shì)：

局限性：