RBL-2H3大鼠嗜堿細(xì)胞性白血病細(xì)胞系
RBL-2H3大鼠嗜堿細(xì)胞性白血病細(xì)胞系是過敏反應(yīng)與免疫炎癥研究的核心模型，源于大鼠嗜堿細(xì)胞性白血病，因精準(zhǔn)模擬嗜堿細(xì)胞的活化功能，成為解析 IgE 介導(dǎo)的過敏機(jī)制及藥物研發(fā)的關(guān)鍵工具。
1978 年，Siraganian 團(tuán)隊(duì)通過氮芥誘導(dǎo)大鼠建立嗜堿細(xì)胞性白血病模型，從中分離出該細(xì)胞系。經(jīng)克隆篩選，其兼具白血病細(xì)胞的無限增殖能力與正常嗜堿細(xì)胞的脫顆粒特性，對(duì) IgE 信號(hào)通路響應(yīng)敏感，這一特質(zhì)使其成為過敏研究的標(biāo)gan模型，至今仍被廣泛沿用。
生物學(xué)特性上，該細(xì)胞呈圓形或橢圓形，貼壁生長(zhǎng)但附著力弱，易形成懸浮集群。胞質(zhì)內(nèi)富含嗜堿顆粒，吉姆薩染色呈紫紅色，顆粒含組胺、白三烯等介質(zhì)。其倍增時(shí)間 28-32 小時(shí)，在 15% 胎牛血清的 MEM 培養(yǎng)基中穩(wěn)定傳代，50 代內(nèi)保持 IgE 受體高表達(dá)，長(zhǎng)期培養(yǎng)需檢測(cè) FcεRI 確保功能。
功能上，其核心是模擬 “IgE - 抗原觸發(fā)脫顆粒" 過程。FcεRI 與 IgE - 抗原結(jié)合后，啟動(dòng)胞內(nèi)鈣信號(hào)，激活 PKC 與 MAPK 通路，促使顆粒釋放組胺、5 - 羥色胺及 IL-4 等?？乖碳?30 分鐘，組胺釋放率達(dá) 40%-60%，與抗原濃度呈劑量依賴，高度契合人體過敏反應(yīng)。
應(yīng)用領(lǐng)域廣泛，在機(jī)制研究中，通過基因操作可明確關(guān)鍵分子作用，如沉默 SYK 激酶使脫顆粒率降 70%，印證其為 IgE 通路核心。藥物篩選中，可評(píng)估抗組胺藥等的效果，檢測(cè)對(duì)組胺釋放、鈣流的抑制，助力候選化合物篩選。
還能用于炎癥交叉研究，釋放的白三烯 B4 誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞趨化，模擬 “過敏 - 炎癥" 級(jí)聯(lián)，Transwell 實(shí)驗(yàn)可觀察炎癥細(xì)胞募集。其表達(dá)的 TLR4 在 LPS 刺激下增強(qiáng)脫顆粒，揭示感染與過敏加重的關(guān)聯(lián)。
培養(yǎng)需 37℃、5% CO?環(huán)境，培養(yǎng)基加必要營(yíng)養(yǎng)，傳代用溫和吹打，多聚賴氨酸包被培養(yǎng)瓶增強(qiáng)貼壁。刺激前用 1-2μg/ml IgE 孵育過夜致敏。凍存用含 10% DMSO 的胎牛血清，梯度降溫存液氮，復(fù)蘇快速解凍離心，存活率超 80%，凍存前需確保細(xì)胞處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期且脫顆粒率達(dá)標(biāo)。
與原代嗜堿細(xì)胞相比，其來源穩(wěn)定、重復(fù)性高、可基因編輯，但缺乏體內(nèi)微環(huán)境，需結(jié)合小鼠模型驗(yàn)證。
總之，RBL-2H3 大鼠嗜堿細(xì)胞性白血病細(xì)胞系憑借對(duì)過敏反應(yīng)的精準(zhǔn)模擬，架起基礎(chǔ)研究與臨床開發(fā)的橋梁，推動(dòng)過敏機(jī)制與藥物研發(fā)的突破。
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