CHO-S/H9C2中國倉鼠卵巢細胞系
在生物醫(yī)學研究領域，細胞系是極為重要的研究工具，它們?yōu)樘骄可鼕W秘、開發(fā)創(chuàng)新療法提供了關鍵的基礎。CHO-S/H9C2中國倉鼠卵巢細胞系便是其中一顆冉冉升起的新星，其構建過程凝聚了科研人員的智慧與努力，蘊含著諸多關鍵節(jié)點。
CHO 細胞，即中國倉鼠卵巢細胞，最初由美國遺傳學家西奧多?帕克（Theodore Puck）在 1957 年從中國倉鼠卵巢中成功分離得到。這一發(fā)現意義重大，因為 CHO 細胞具備諸多優(yōu)良特性，如可以進行貼壁或懸浮培養(yǎng)，易于進行基因轉染，能夠對蛋白進行翻譯后修飾等，這使得它成為哺乳動物基因表達的優(yōu)質宿主細胞，在后續(xù)的生物制藥與基礎研究中展現出巨大潛力。隨著研究的不斷深入，科學家們對 CHO 細胞進行了多方面的改造與馴化，從中衍生出多種不同特性的細胞系，以滿足不同研究與生產需求。其中，CHO-S 細胞系是在 1971 年，由多倫多大學的 Thompson 對 CHO-K1 細胞進行馴化后得到的懸浮細胞系。它能夠在生物反應器中實現大規(guī)模培養(yǎng)，極大地推動了生物藥的工業(yè)化生產進程，為大規(guī)模生產生物藥奠定了基礎。這一成果也促使科研人員不斷探索，期望借助 CHO-S 細胞的優(yōu)勢，構建出具備特定功能的細胞系。
K7OE10 蛋白與細胞代謝調控緊密相關，對它的深入研究有助于揭示細胞代謝的精細機制，為攻克代謝相關疾病提供新的思路與靶點。然而，在天然細胞環(huán)境中，K7OE10 蛋白的表達量相對較低，這給相關研究帶來了極大阻礙。為了突破這一瓶頸，科研人員決定利用基因工程技術，將 K7OE10 基因導入合適的細胞系中，使其能夠穩(wěn)定且高效地表達 K7OE10 蛋白。經過綜合考量，CHO-S 細胞脫穎而出，成為理想的基因導入受體。它本身具有良好的懸浮培養(yǎng)特性，能夠適應大規(guī)模培養(yǎng)需求，且遺傳背景相對清晰，便于后續(xù)的基因操作與研究。
科研人員通過慢病毒載體介導的方法，將精心設計的 K7OE10 基因導入 CHO-S 細胞中。慢病毒載體具有高效整合外源基因、能夠穩(wěn)定表達等優(yōu)點，能夠確保 K7OE10 基因順利進入 CHO-S 細胞的基因組，并實現穩(wěn)定的遺傳與表達。在導入基因后，細胞群體呈現出多樣性，并非所有細胞都能按照預期高效表達 K7OE10 蛋白。因此，科研人員利用抗性篩選及單克隆純化技術，對細胞群體進行篩選與純化。他們在培養(yǎng)基中添加特定的抗性藥物，只有成功整合并表達 K7OE10 基因的細胞才能在這種環(huán)境下存活。隨后，通過單克隆技術，將單個陽性細胞分離出來，進行單獨培養(yǎng)與擴增，最終獲得了均一性良好、能夠穩(wěn)定表達 K7OE10 蛋白的細胞系，即 CHO-S/K7OE10-1D6 細胞系。“K7OE10-1D6" 這一名稱清晰地標識了該細胞系過表達的蛋白以及克隆編號，確保了蛋白表達的穩(wěn)定性與均一性，為后續(xù)深入研究 K7OE10 蛋白的功能、參與的生物通路以及在代謝相關疾病中的作用機制，提供了強有力的工具。
以上信息僅供參考，詳細信息請聯系我們。
13
化工儀器網