RNSK/HL-010|大鼠正常皮膚角質(zhì)細胞系
RNSK/HL-010|大鼠正常皮膚角質(zhì)細胞系作為源自大鼠表皮基底層的正常角質(zhì)形成細胞模型，因保留皮膚角質(zhì)細胞的增殖分化特性及屏障構(gòu)建功能，在皮膚屏障功能、創(chuàng)傷修復機制及皮膚病病理研究中具有重要價值，成為探究皮膚表皮生理功能及相關(guān)疾病的關(guān)鍵實驗工具。
細胞特性與來源背景：該細胞系源自大鼠背部皮膚表皮組織，經(jīng)原代培養(yǎng)和純化獲得。細胞形態(tài)呈多邊形，部分呈梭形，胞體大小均勻（直徑約 14-18μm），胞質(zhì)呈嗜酸性，可見角質(zhì)顆粒，約 15% 細胞呈現(xiàn)扁平狀分化特征，細胞核呈圓形或橢圓形，位于細胞中央，核仁小而清晰。生長方式為貼壁生長，呈單層魚鱗狀排列，具有明顯的接觸抑制現(xiàn)象，傳代后 24 小時貼壁率達 92%。核心參數(shù)表現(xiàn)出正常皮膚角質(zhì)細胞特征：倍增時間約 65 小時，連續(xù)傳代 14 次后仍保持穩(wěn)定的生物學特性；表面標志物表達du特，細胞角蛋白 10（CK10）陽性率達 95%，角質(zhì)細胞分化標志物 involucrin 陽性率 88%，整合素 β1 陽性率 93%；具有正常的二倍體核型（染色體數(shù) 42 條），無染色體畸變；可合成角質(zhì)形成細胞特異性蛋白絲聚蛋白，基礎表達量達 40ng/mL，在鈣濃度升高時表達量增加 2.8 倍；能形成多層上皮結(jié)構(gòu)，分化 3 周后可出現(xiàn)明顯的角質(zhì)層；無微生物污染，細胞純度達 96%，保障實驗結(jié)果的可靠性。
科研應用價值：在皮膚屏障功能研究中，RNSK/HL-010 細胞經(jīng)十二烷基硫酸鈉（SDS）處理 24 小時后，絲聚蛋白表達量下降 45%，跨上皮電阻值降低 50%，經(jīng)皮水分流失率增加 60%，可模擬化學刺激導致的皮膚屏障損傷過程，為解析皮膚屏障破壞機制提供理想模型。
在創(chuàng)傷修復研究方面，該細胞經(jīng)血小板衍生生長因子（PDGF）處理 48 小時后，遷移速率增加 55%，增殖活性提升 48%，基質(zhì)金屬蛋白酶 - 2（MMP-2）活性增強 3.2 倍，可模擬皮膚創(chuàng)傷后的角質(zhì)細胞遷移修復過程，適用于探究創(chuàng)傷愈合機制及評估促修復藥物療效。
皮膚病研究領域，該細胞經(jīng)腫瘤壞死因子 -α（TNF-α）處理后，炎癥因子 IL-6 分泌量增加 4.3 倍，趨化因子 CXCL8 表達量提升 3.8 倍，角質(zhì)形成細胞凋亡率增加 30%，能很好地模擬銀屑病中角質(zhì)細胞的異?；罨癄顟B(tài)，為篩選皮膚病治療靶點提供實驗基礎。此外，該細胞與成纖維細胞共培養(yǎng)時，成纖維細胞的 Ⅰ 型膠原蛋白分泌量增加 2.5 倍，可用于探究表皮 - 真皮相互作用在皮膚穩(wěn)態(tài)維持中的調(diào)控機制。
培養(yǎng)與保存規(guī)范：推薦使用含 10% 胎牛血清的 Keratinocyte Growth Medium 2 培養(yǎng)基，添加 0.1ng/mL 表皮生長因子（EGF）、0.4mM 氯化鈣及 1% 抗生素混合液，培養(yǎng)環(huán)境為 37℃、5% CO?飽和濕度培養(yǎng)箱。培養(yǎng)基需每 2-3 天更換一次，以維持細胞的增殖分化平衡。傳代時，用 PBS 沖洗細胞 2 次，加入專用細胞解離液，37℃孵育 8-10 分鐘，待細胞間隙增大后輕輕吹打使細胞脫落，傳代比例為 1:3-1:4，每 5-6 天傳代一次，避免過度傳代導致分化能力下降。
凍存液采用培養(yǎng)基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清的混合液，細胞濃度調(diào)整為 3×10?個 /ml，經(jīng)程序降溫（-20℃1 小時→-80℃過夜→液氮保存）后，復蘇存活率達 85% 以上，2-3 代內(nèi)可恢復正常的生長和分化功能。運輸采用干冰冷凍運輸或培養(yǎng)瓶活細胞運輸，收到細胞后需靜置培養(yǎng) 24 小時，更換培養(yǎng)基后觀察細胞形態(tài)，確認無異常漂浮物且排列整齊后進行實驗。該細胞系僅限科研使用，操作時需避免頻繁調(diào)整培養(yǎng)環(huán)境鈣濃度，以防影響細胞分化狀態(tài)。
RNSK/HL-010 大鼠正常皮膚角質(zhì)細胞系以其穩(wěn)定的增殖分化特性、完整的皮膚屏障構(gòu)建能力及典型的表皮細胞功能，在皮膚生物學研究與皮膚病機制探索中發(fā)揮著重要作用，為揭示皮膚疾病的發(fā)病機制和開發(fā)新型治療藥物提供了可靠的細胞模型。
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