NRK大鼠腎細(xì)胞系
NRK大鼠腎細(xì)胞系作為源自大鼠腎臟皮質(zhì)的正常腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞模型，因保留腎臟的物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)功能及損傷應(yīng)答特性，在腎臟生理功能調(diào)控、腎損傷修復(fù)機(jī)制及腎臟疾病病理研究中具有重要價(jià)值，成為探究腎臟相關(guān)生理與病理過程的關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)工具。
細(xì)胞特性與來源背景：該細(xì)胞系源自大鼠腎臟皮質(zhì)的近曲小管區(qū)域，經(jīng)原代培養(yǎng)和純化獲得。細(xì)胞形態(tài)呈上皮樣，多為多邊形或立方形，胞體大小均勻（直徑約 16-20μm），胞質(zhì)豐富且呈嗜酸性，可見較多的線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，約 12% 細(xì)胞可見細(xì)小的胞質(zhì)突起，細(xì)胞核呈圓形或橢圓形，位于細(xì)胞中央，核仁清晰。生長方式為貼壁生長，呈單層鋪路石樣排列，具有明顯的接觸抑制現(xiàn)象，傳代后 24 小時(shí)貼壁率達(dá) 93%。核心參數(shù)表現(xiàn)出正常腎細(xì)胞特征：倍增時(shí)間約 60 小時(shí)，連續(xù)傳代 20 次后仍保持穩(wěn)定的生物學(xué)特性；表面標(biāo)志物表達(dá)du特，細(xì)胞角蛋白 18（CK18）陽性率達(dá) 95%，腎臟近曲小管標(biāo)志物 γ- 谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶（GGT）陽性率 92%，上皮細(xì)胞黏附分子（EpCAM）陽性率 90%；具有正常的二倍體核型（染色體數(shù) 42 條），無染色體畸變；物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)功能活躍，葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)速率達(dá) 28nmol/(h?mg 蛋白)，氨基酸吸收量達(dá) 35nmol/(h?10?細(xì)胞)；可分泌腎特異性蛋白，尿調(diào)節(jié)素基礎(chǔ)分泌量達(dá) 22ng/mL；無微生物污染，細(xì)胞純度達(dá) 96%，保障實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。
科研應(yīng)用價(jià)值：在腎臟物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)研究中，NRK 細(xì)胞經(jīng)血管升壓素處理 48 小時(shí)后，水通道蛋白 2（AQP2）表達(dá)量增加 3.2 倍，水重吸收速率提升 55%，可模擬激素對腎小管水轉(zhuǎn)運(yùn)功能的調(diào)控過程，為解析腎臟水代謝機(jī)制提供理想模型。
在腎損傷修復(fù)研究方面，該細(xì)胞經(jīng)腎毒性藥物處理后，乳酸脫氫酶（LDH）釋放量增加 4.2 倍，炎癥因子 IL-6 分泌量提升 58%，細(xì)胞凋亡率達(dá) 35%；而經(jīng)腎臟保護(hù)因子處理后，細(xì)胞存活率提升 45%，增殖活性增加 50%，可模擬化學(xué)性腎損傷及修復(fù)過程，適用于探究腎損傷修復(fù)的分子機(jī)制。
腎臟疾病研究領(lǐng)域，該細(xì)胞經(jīng)高尿酸（600μmol/L）處理后，氧化應(yīng)激水平提升 60%，炎癥因子 TNF-α 分泌量增加 4.5 倍，細(xì)胞外基質(zhì)蛋白表達(dá)量提升 38%，能很好地模擬高尿酸血癥引起的腎損傷，為探究痛風(fēng)性腎病的發(fā)病機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。此外，該細(xì)胞與腎間質(zhì)成纖維細(xì)胞共培養(yǎng)時(shí)，成纖維細(xì)胞的 α- 平滑肌肌動蛋白（α-SMA）表達(dá)量增加 3 倍，可用于探究腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞與間質(zhì)細(xì)胞相互作用在腎纖維化中的調(diào)控機(jī)制。
培養(yǎng)與保存規(guī)范：推薦使用含 10% 胎牛血清的 DMEM 培養(yǎng)基，添加 1% 非必需氨基酸及 1% 抗生素混合液，培養(yǎng)環(huán)境為 37℃、5% CO?飽和濕度培養(yǎng)箱。培養(yǎng)基需每 2-3 天更換一次，以維持細(xì)胞的正常功能。傳代時(shí)，用 PBS 沖洗細(xì)胞 2 次，加入專用細(xì)胞解離液，37℃孵育 8-10 分鐘，待細(xì)胞間隙增大后輕輕吹打使細(xì)胞脫落，傳代比例為 1:3-1:4，每 5-6 天傳代一次，避免過度傳代導(dǎo)致功能下降。
凍存液采用培養(yǎng)基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清的混合液，細(xì)胞濃度調(diào)整為 3×10?個(gè) /ml，經(jīng)程序降溫（-20℃1 小時(shí)→-80℃過夜→液氮保存）后，復(fù)蘇存活率達(dá) 85% 以上，3-4 代內(nèi)可恢復(fù)正常的生長和轉(zhuǎn)運(yùn)功能。運(yùn)輸采用干冰冷凍運(yùn)輸或培養(yǎng)瓶活細(xì)胞運(yùn)輸，收到細(xì)胞后需靜置培養(yǎng) 24 小時(shí)，更換培養(yǎng)基后觀察細(xì)胞形態(tài)，確認(rèn)無異常漂浮物且排列整齊后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。該細(xì)胞系僅限科研使用，操作時(shí)需避免頻繁更換培養(yǎng)條件，以防影響其物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)功能。
NRK 大鼠腎細(xì)胞系以其穩(wěn)定的腎臟細(xì)胞特性、完整的物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)功能及典型的損傷應(yīng)答能力，在腎臟生物學(xué)研究與腎臟疾病機(jī)制探索中發(fā)揮著重要作用，為揭示腎臟疾病的發(fā)病機(jī)制和開發(fā)腎臟保護(hù)藥物提供了可靠的細(xì)胞模型。
以上信息僅供參考，詳細(xì)信息請聯(lián)系我們。
13
化工儀器網(wǎng)