目錄:上海乾思生物科技有限公司>>細(xì)胞>>細(xì)胞系>> BY-0639CTLA4 Ig-24中國倉鼠卵巢細(xì)胞系
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來源與形態(tài):該細(xì)胞系源自中國倉鼠卵巢細(xì)胞(CHO),通過基因轉(zhuǎn)染技術(shù)導(dǎo)入 CTLA4-Ig 融合基因(由細(xì)胞毒性 T 淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原 4 的胞外區(qū)與免疫球蛋白 Fc 段組成),經(jīng)篩選獲得穩(wěn)定表達(dá)株。體外培養(yǎng)時呈上皮樣形態(tài),貼壁生長,細(xì)胞呈多邊形,排列緊密,邊緣清晰。在 37℃、5% CO?的培養(yǎng)環(huán)境中,增殖穩(wěn)定,傳代周期約 3 天,可適應(yīng)貼壁培養(yǎng)或懸浮培養(yǎng)體系。
遺傳特征:保留 CHO 細(xì)胞的核型特點(diǎn)(染色體數(shù)目約 20-22 條,非整倍體),基因組經(jīng)人工修飾后,CTLA4-Ig 基因整合于染色體穩(wěn)定區(qū)域,可長期穩(wěn)定表達(dá)目標(biāo)蛋白。其遺傳背景清晰,無內(nèi)源性病毒序列,且對嘌呤類似物等篩選標(biāo)記敏感,便于單克隆細(xì)胞株的純化與傳代。
免疫調(diào)節(jié)機(jī)制研究
生物制藥與藥物開發(fā)
抗體藥物篩選
優(yōu)勢:能穩(wěn)定、高效表達(dá)具有生物活性的 CTLA4-Ig 蛋白,產(chǎn)物純度高、均一性好;繼承 CHO 細(xì)胞的培養(yǎng)優(yōu)勢,可適應(yīng)無血清懸浮培養(yǎng),便于工業(yè)化放大生產(chǎn);且細(xì)胞遺傳穩(wěn)定性強(qiáng),長期傳代后仍保持目標(biāo)蛋白的高表達(dá)量,實(shí)驗(yàn)重復(fù)性優(yōu)異。
局限性:作為動物細(xì)胞系,其表達(dá)的 CTLA4-Ig 蛋白糖基化模式與人類細(xì)胞存在細(xì)微差異,可能影響部分臨床應(yīng)用中的免疫原性;此外,目標(biāo)蛋白的表達(dá)量受培養(yǎng)條件影響較大,需通過優(yōu)化培養(yǎng)基成分(如添加特定氨基酸)提升產(chǎn)量。
培養(yǎng)條件:常規(guī)使用含 10% 胎牛血清的 DMEM/F12 培養(yǎng)基,若用于蛋白生產(chǎn),可改用化學(xué)成分明確的無血清培養(yǎng)基,減少外源蛋白干擾。培養(yǎng)過程中需控制細(xì)胞密度(貼壁培養(yǎng)融合度不超過 80%),避免過度密集導(dǎo)致表達(dá)量下降。
污染防控:嚴(yán)格無菌操作,定期檢測支原體污染(推薦 PCR 法);凍存時采用含 10% DMSO 的凍存液,梯度降溫后保存于液氮中,復(fù)蘇時 37℃快速解凍,離心去除 DMSO 以保護(hù)細(xì)胞活性。
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