來源與永生化：該細(xì)胞系源自中國倉鼠成年肺組織，經(jīng)原代培養(yǎng)與克隆篩選獲得永生化株系，“V79" 命名源自早期克隆編號。原代細(xì)胞通過酶解法分離，經(jīng) 50 代連續(xù)傳代篩選出增殖穩(wěn)定的單克隆，永生化過程未引入外源基因，主要依賴體外培養(yǎng)壓力實(shí)現(xiàn)，全基因組測序顯示其與原代肺成纖維細(xì)胞遺傳相似度＞97%，核型分析證實(shí)染色體數(shù)目為 2n=22，核型穩(wěn)定性優(yōu)于多數(shù)成纖維細(xì)胞系（傳代 100 次核型畸變率＜2%）。

形態(tài)與增殖：體外培養(yǎng)呈典型成纖維樣形態(tài)，貼壁生長時(shí)呈長梭形，胞體細(xì)長且胞質(zhì)伸展明顯，細(xì)胞排列呈平行或漩渦狀；懸浮培養(yǎng)易聚集成團(tuán)，故以貼壁培養(yǎng)為主。37℃、5% CO?條件下，增殖周期約 24-28 小時(shí)，較 CHL 細(xì)胞更短，適應(yīng)含 10% 胎牛血清的 DMEM 培養(yǎng)基，傳代 150 次以上生長速率衰減＜10%，自發(fā)突變率＜1×10??，凍存復(fù)蘇后存活率超 88%。

功能特征：核心優(yōu)勢在于低背景突變與高代謝活性：HGPRT（次黃piao呤鳥piao呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶）基因自發(fā)突變率極低（＜5×10??），便于基因突變事件的檢測；Ⅰ 相代謝酶（如 CYP1A1）表達(dá)量較 CHL 細(xì)胞高 30%，可直接代謝部分前致突變物，無需額外添加代謝活化系統(tǒng)，符合 OECD 476 基因突變測試指南要求。同時(shí)，其對輻射損傷響應(yīng)靈敏，γ 射線照射后 DNA 雙鏈斷裂標(biāo)志物 γH2AX 焦點(diǎn)形成效率較普通細(xì)胞高 25%。

貼壁培養(yǎng)操作：

基因突變測試流程：

凍存流程：取對數(shù)生長期細(xì)胞，1000rpm 離心 5 分鐘，凍存液（70% DMEM+20% 胎牛血清 + 10% DMSO）重懸至 6×10?個(gè) /mL，分裝凍存管，程序降溫盒 - 80℃過夜后移至液氮，保存期超 5 年，復(fù)蘇后傳代 1-2 次即可用于實(shí)驗(yàn)。

優(yōu)勢：自發(fā)突變率低（＜1×10??），基因突變檢測準(zhǔn)確性高；代謝活性強(qiáng)，可直接代謝多數(shù)前致突變物；對輻射與化學(xué)誘變劑敏感性高，檢測下限低；傳代穩(wěn)定性好，150 代內(nèi)生物學(xué)特性無顯著改變；培養(yǎng)周期短，實(shí)驗(yàn)效率優(yōu)于 CHL 細(xì)胞。

局限性：成纖維細(xì)胞特性限制其在上皮細(xì)胞特異性毒性研究中的應(yīng)用；部分水溶性極差的受試物需添加助溶劑（可能影響代謝活性）；長期傳代（＞180 次）可能出現(xiàn)代謝酶活性下降（約 15%），需定期復(fù)蘇早期凍存株。