來(lái)源與篩選：該細(xì)胞系以 CHO-K1 為親本，通過(guò)亞硝ji胍化學(xué)誘變結(jié)合表觀遺傳表型篩選獲得。經(jīng)多輪單克隆純化，挑選出第 9 株組蛋白修飾譜改變zui顯著的克隆（“JJ-9" 標(biāo)識(shí)誘變批次與克隆編號(hào)）。篩選過(guò)程未引入基因編輯，僅通過(guò)檢測(cè)組蛋白修飾整體水平（如乙?；⒓谆偤浚┐_定陽(yáng)性克隆，全基因組測(cè)序顯示與親本相似度＞99.5%，確保遺傳背景的穩(wěn)定性。

形態(tài)與增殖：體外培養(yǎng)呈上皮樣形態(tài)，貼壁生長(zhǎng)時(shí)細(xì)胞鋪展均勻，較野生型 CHO 稍大且邊界清晰；因染色質(zhì)功能異常，懸浮培養(yǎng)易聚集成團(tuán)（直徑 50-100μm），故主要以貼壁方式培養(yǎng)。37℃、5% CO?條件下，增殖周期約 36-42 小時(shí)，較野生型延長(zhǎng) 6-8 小時(shí)，適應(yīng)含 10% 胎牛血清的 DMEM/F12 培養(yǎng)基，傳代 60 次以上組蛋白修飾異常表型穩(wěn)定（整體波動(dòng)＜8%），凍存復(fù)蘇后存活率超 84%。

功能特征：核心優(yōu)勢(shì)在于組蛋白修飾的廣泛性改變：整體組蛋白乙酰化水平較野生型升高 25%，甲基化水平降低 18%，導(dǎo)致全基因組染色質(zhì)開(kāi)放度顯著變化（ATAC-seq 顯示 18% 的基因組區(qū)域可及性改變），其中增強(qiáng)子區(qū)域開(kāi)放度差異最tu出（上調(diào)區(qū)域占 12%，下調(diào)區(qū)域占 15%）。ChIP-seq 驗(yàn)證顯示，多個(gè)組蛋白修飾（如 H3K4me3、H3K27ac）的分布模式改變，使涉及細(xì)胞代謝、應(yīng)激響應(yīng)的 843 個(gè)基因表達(dá)量出現(xiàn) 2-5 倍差異，模擬了復(fù)雜表觀遺傳擾動(dòng)下的基因調(diào)控表型。

貼壁培養(yǎng)操作：

組蛋白修飾檢測(cè)：

凍存流程：取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞，1000rpm 離心 5 分鐘，用凍存液（70% wan全培養(yǎng)基 + 20% 胎牛血清 + 10% DMSO）重懸至 5×10?個(gè) /mL，分裝至凍存管，程序降溫盒 - 80℃過(guò)夜，次日轉(zhuǎn)移至液氮保存，保存期可達(dá) 5 年以上，復(fù)蘇后需傳代 2-3 次再進(jìn)行表觀遺傳相關(guān)實(shí)驗(yàn)（確保修飾狀態(tài)穩(wěn)定）。

優(yōu)勢(shì)：組蛋白修飾改變范圍廣，可模擬復(fù)雜表觀遺傳擾動(dòng)；表型穩(wěn)定，傳代 60 次整體修飾水平波動(dòng)＜8%；無(wú)外源基因整合，保留天然表觀遺傳互作網(wǎng)絡(luò)；適合多靶點(diǎn)藥物篩選，檢測(cè)效率較單一修飾模型提升 40%。

局限性：修飾改變的復(fù)雜性使單一調(diào)控機(jī)制解析難度增加（需結(jié)合單修飾模型驗(yàn)證）；貼壁依賴性強(qiáng)，懸浮培養(yǎng)會(huì)導(dǎo)致修飾譜改變（約 12%）；部分實(shí)驗(yàn)需配套多組學(xué)數(shù)據(jù)分析，技術(shù)門(mén)檻較高。