來源與構(gòu)建：該細(xì)胞系以 BHK-21 倉鼠腎細(xì)胞為親本，通過脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染導(dǎo)入含 BQS24 啟動子、目的基因多克隆位點(diǎn)及新mei素抗性基因的表達(dá)載體，經(jīng) G418 篩選及單克隆純化獲得穩(wěn)定株。“BQS24" 標(biāo)識其核心調(diào)控元件 ——BQS24 啟動子（一種受病毒感染誘導(dǎo)的順式作用元件），可在病毒復(fù)制時(shí)啟動下游基因表達(dá)，實(shí)現(xiàn) “病毒感應(yīng) - 基因激活" 的聯(lián)動效應(yīng)。

形態(tài)與增殖：體外培養(yǎng)呈典型成纖維樣形態(tài)，貼壁生長，細(xì)胞呈長梭形，排列疏松，核質(zhì)比適中，邊界清晰。在 37℃、5% CO?條件下，增殖周期約 22-28 小時(shí)，適應(yīng)含 10% 胎牛血清的 DMEM 培養(yǎng)基，傳代 60 次以上仍保持穩(wěn)定生長速率，BQS24 元件活性無明顯衰減，凍存復(fù)蘇后存活率超 85%。

功能特征：該細(xì)胞系的核心優(yōu)勢在于 BQS24 啟動子的病毒響應(yīng)性：在未感染狀態(tài)下，下游基因基礎(chǔ)表達(dá)量極低（僅為 CMV 啟動子的 1%-3%）；感染水皰性口炎病毒（VSV）、脊髓灰質(zhì)炎病毒等后，啟動子被快速激活，4-6 小時(shí)內(nèi)報(bào)告基因表達(dá)量提升 50-100 倍（熒光素酶檢測），且激活強(qiáng)度與病毒滴度呈正相關(guān)（線性范圍 102-10? PFU/mL），可作為病毒感染的 “生物傳感器"。

貼壁培養(yǎng)操作：

病毒誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)處理：

凍存流程：取對數(shù)生長期細(xì)胞，1000rpm 離心 5 分鐘，用凍存液（70% wan全培養(yǎng)基 + 20% 胎牛血清 + 10% DMSO）重懸至 4×10?個(gè) /mL，分裝至凍存管，程序降溫盒 - 80℃過夜，次日轉(zhuǎn)移至液氮保存，保存期可達(dá) 5 年以上。

優(yōu)勢：BQS24 元件響應(yīng)迅速，病毒感染后 4 小時(shí)內(nèi)即可檢測到信號；基因調(diào)控動態(tài)范圍寬，適合量化分析；貼壁性能優(yōu)異，可用于長時(shí)程共聚焦成像；對多種 DNA 和 RNA 病毒均有響應(yīng)，適用范圍廣。

局限性：高滴度病毒感染（MOI＞5）會導(dǎo)致細(xì)胞病變，影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)；部分病毒（如腺病毒）可能不激活 BQS24 啟動子，需提前驗(yàn)證適配性；長期傳代可能導(dǎo)致 G418 抗性丟失，需定期篩選陽性克隆。