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表觀遺傳激活或失活在許多重要人類疾病中起著關鍵作用,尤其是在癌癥中。
表觀遺傳基因失活的主要機制是DNA甲基轉(zhuǎn)移酶引起的基因組DNA中CpG島的甲基化。組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶(HMTs)通過染色質(zhì)依賴的轉(zhuǎn)錄抑制或激活來控制或調(diào)節(jié)DNA甲基化。HMTs將1-3個甲基基團從S-腺苷-L-蛋氨酸轉(zhuǎn)移到組蛋白的賴氨酸和精氨酸殘基上。SETD2和NSD2是主要的組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶,它們催化哺乳動物細胞中組蛋白H3在賴氨酸36(H3K36)上的三甲基化。JHDMs和JMJDs是主要的組蛋白去甲基化酶,它們能夠使H3K36去甲基化。H3K36me3一直被視為轉(zhuǎn)錄抑制基因的標志性標記,它僅存在于啟動子下游的5'區(qū)域。H3K36me3的水平也可以通過抑制或激活HMTs而改變。在血漿或血清中檢測到的循環(huán)H3K36me3已被證明是許多不同疾病或病理變化(如癌癥進展)的標志物。因此,檢測循環(huán)H3K36me3能夠為更好地理解基因激活和沉默的表觀遺傳調(diào)控、與組蛋白修飾相關的病理過程、疾病相關生物標志物的篩選以及開發(fā)針對組蛋白修飾的藥物提供有用信息。
EpiQuik™循環(huán)三甲基組蛋白H3K36 ELISA試劑盒(比色法)是一種方便的工具包,允許實驗者從生物液體樣本(如人類、小鼠或大鼠的血漿和血清)中特異性地檢測循環(huán)三甲基組蛋白H3K36(H3K36me3)。
艾美捷EpiQuik循環(huán)三甲基組蛋白H3K36 ELISA試劑盒(比色法)(#P-3130-48)優(yōu)勢與特點:
1、快速高效的實驗流程,可在2.5小時內(nèi)完成。
2、高靈敏度和特異性。檢測限低至0.5 ng/孔,血漿/血清中指示量范圍內(nèi)的動態(tài)范圍為1-20 ng/孔。僅識別H3K36me3,與未修飾的H3或其他同一賴氨酸位點的修飾物無交叉反應。
3、方便地包含對照用于H3K36me3的定量。
4、條帶微孔板格式使實驗靈活:可手動或高通量操作。
5、簡單、可靠且一致的實驗條件。
圖:從HL-60細胞中使用EpiQuik™總組蛋白提取試劑盒(產(chǎn)品編號:OP0006)制備組蛋白提取物,并將其以不同濃度加入牛血漿中。隨后利用EpiQuik™循環(huán)三甲基組蛋白H3K36 ELISA試劑盒(比色法)測定了H3K36me3的含量。
原理與操作流程:
本試劑盒用于測量血漿或血清中的總H3K36me3。在使用該試劑盒的實驗中,血漿/血清樣本中三甲基化于K36的組蛋白H3蛋白被涂有抗H3K36me3抗體的條帶孔捕獲。捕獲的H3K36me3蛋白隨后可被檢測抗體識別,并通過比色顯色試劑進行顯色。H3K36me3的比例與吸光強度成正比。通過與標準對照比較,可以定量H3K36me3的絕對量。
起始材料:
起始材料應為血漿或血清。每次實驗所需的血漿或血清量為10至40 µl,最佳量為30 µl。
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