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EpiQuik™循環(huán)乙酰化組蛋白H3K9 ELISA試劑盒(比色法)是專為定量檢測(cè)血漿和血清中的循環(huán)組蛋白H3K9ac而設(shè)計(jì)的。
艾美捷EpiQuik循環(huán)乙酰組蛋白 H3K9 ELISA試劑盒(比色法)(#P-3132-48)優(yōu)勢(shì)與特點(diǎn):
1、快速高效的實(shí)驗(yàn)流程,可在2.5小時(shí)內(nèi)完成。
2、高靈敏度和特異性。檢測(cè)限低至0.5 ng/孔,在血漿/血清中指示量范圍內(nèi)的動(dòng)態(tài)范圍為1-20 ng/孔。僅識(shí)別H3K9ac,與未修飾的H3或其他同一賴氨酸位點(diǎn)的修飾物無交叉反應(yīng)。
3、方便地包含對(duì)照用于H3K9ac的定量。
4、條帶微孔板格式使實(shí)驗(yàn)靈活:可手動(dòng)或高通量操作。
5、簡(jiǎn)單、可靠且一致的實(shí)驗(yàn)條件。
原理與操作流程:
EpiQuik™循環(huán)乙?;M蛋白H3K9 ELISA試劑盒(比色法)是用于測(cè)量血漿或血清中總H3K9ac的。在使用該試劑盒的實(shí)驗(yàn)中,血漿/血清樣本中乙酰化于K9的組蛋白H3蛋白被涂有抗H3K9ac抗體的條帶孔捕獲。捕獲的H3K9ac蛋白隨后可被檢測(cè)抗體識(shí)別,并通過比色顯色試劑進(jìn)行顯色。H3K9ac的比例與吸光強(qiáng)度成正比。通過與標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照比較,可以定量H3K9ac的絕對(duì)量。
EpiQuik™循環(huán)乙?;M蛋白H3K9 ELISA試劑盒(比色法)的示意圖
工作緩沖液和溶液的準(zhǔn)備:
a. 準(zhǔn)備稀釋的WB(1倍洗液):
48次檢測(cè)試劑盒:將13毫升的WB(10倍洗液)加入117毫升的蒸餾水中,并將pH值調(diào)整至7.2-7.5。
96次檢測(cè)試劑盒:將26毫升的WB(10倍洗液)加入234毫升的蒸餾水中,并將pH值調(diào)整至7.2-7.5。
此稀釋的WB(1倍洗液)現(xiàn)在可以在4℃下保存長(zhǎng)達(dá)六個(gè)月。
b. 準(zhǔn)備稀釋的DAb溶液:
用稀釋的WB(1倍洗液)按1:1000的比例稀釋DAb(即,將1微升的DAb加入1000微升的稀釋WB中)。每個(gè)檢測(cè)孔需要50微升的稀釋DAb。
c. 準(zhǔn)備稀釋的標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照:
建議的標(biāo)準(zhǔn)曲線制備方法:首先,通過將5微升的標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照加入5微升的HAB(組蛋白檢測(cè)緩沖液)中,稀釋標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照至50納克/微升;再通過將1微升的標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照加入19微升的HAB中,稀釋至5納克/微升。然后,利用5納克/微升和50納克/微升的稀釋標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照與HAB進(jìn)一步配制出七種濃度,最終濃度分別為0.5、1、2、5、10、20和50納克。
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