CRISPR（成簇規(guī)律間隔短回文重復(fù)序列）和 Cas9（CRISPR 相關(guān)系統(tǒng)或 CRISPR 相關(guān)蛋白 9 核酸酶）是在細(xì)菌中發(fā)現(xiàn)的一種防御機制，用于抵御外來 DNA。這一系統(tǒng)的發(fā)現(xiàn)已被證明是基因編輯和基因組工程應(yīng)用中靶向和修改遺傳序列。該系統(tǒng)被稱為 CRISPR/Cas9，通過將 RNA 引導(dǎo)的 Cas9 核酸酶和適當(dāng)?shù)囊龑?dǎo) RNA（gRNA）導(dǎo)入細(xì)胞，實現(xiàn)對目標(biāo)基因組位點的序列特異性切割。此外，緊隨特異性序列之后的原間隔相鄰基序（PAM）序列對于 Cas9 核酸酶的成功結(jié)合是必需的。監(jiān)測 Cas9 編輯蛋白的水平或在轉(zhuǎn)染細(xì)胞中追蹤 Cas9 編輯蛋白是重要且關(guān)鍵的，因為這可以告知轉(zhuǎn)染效率并優(yōu)化細(xì)胞群體中的編輯過程。已有報道表明，金黃色葡萄球菌 Cas9（SaCas9）介導(dǎo)的基因組編輯已在人類細(xì)胞和擬南芥中實現(xiàn)。由于 SaCas9（1053 個氨基酸）比化膿性鏈球菌 Cas9（SpCas9）（1368 個氨基酸）更小，SaCas9 在遞送和表達 Cas9 蛋白方面可能具有顯著優(yōu)勢，尤其是在使用病毒載體時。

目前，WB是測量 SaCas9 蛋白表達或含量的突出的檢測技術(shù)。然而，這種傳統(tǒng)方法需要電泳和轉(zhuǎn)膜過程，使得檢測過程不便、耗時且通量低。EpiQuik™ CRISPR/SaCas9（金黃色葡萄球菌）檢測試劑盒（比色法）通過采用特別的方法來測量 SaCas9 蛋白的含量，解決了這些問題。

艾美捷EpiQuik CRISPR/SaCas9(S. aureus)檢測ELISA試劑盒（比色法）（#P-4062-48）優(yōu)勢與特點：

1、快速高效的操作流程，可在 3 小時內(nèi)完成。

2、創(chuàng)新的比色法高通量檢測，無需電泳即可定量測量 Cas9 蛋白含量，特別適合篩選 Cas9 轉(zhuǎn)染克隆。

3、高靈敏度和特異性。檢測限低至 0.1 ng/孔，檢測范圍為 0.5-20 ng/孔，適用于全細(xì)胞提取物的指定含量范圍。僅識別 SaCas9（金黃色葡萄球菌）。

4、方便地包含了用于定量 SaCas9 含量的對照。

5、條帶式微孔板格式使檢測既適用于手動操作，也適用于高通量分析。

6、簡單、可靠且一致的檢測條件。

圖：將不同濃度的 SaCas9 蛋白加入到 1 µg 的 K562 細(xì)胞提取物中。使用 EpiQuik™ CRISPR/SaCas9（金黃色葡萄球菌）檢測試劑盒（比色法）測量了 SaCas9 蛋白的含量。