N6 - 甲基腺苷（m6A）是真核生物中 RNA 分子上最常見且豐富的修飾。在多細(xì)胞真核生物中也發(fā)現(xiàn)了 DNA 上的 m6A，包括秀麗隱桿線蟲和黑腹果蠅，此外在高等真核生物中也發(fā)現(xiàn)了，包括植物、小鼠和人類細(xì)胞。m6A 在調(diào)控 DNA 復(fù)制、轉(zhuǎn)座、轉(zhuǎn)錄和細(xì)胞防御中起著至關(guān)重要的作用。在人類中，DNA 上的 m6A 修飾很可能是由甲基轉(zhuǎn)移酶復(fù)合體 METTL3 催化生成的，并且可被 α - 酮戊二酸（α - KG）和 Fe2 + 依賴的雙加氧酶（如 ALKBH5 和 TET 類似酶）去除。研究表明，METTL3 和 α - KG/Fe2 + 依賴的雙加氧酶在許多生物學(xué)過程中發(fā)揮著重要作用，從發(fā)育和代謝到生育能力都有涉及。DNA 上動態(tài)且可逆的化學(xué) m6A 修飾也可能作為一種具有深遠(yuǎn)生物學(xué)意義的新型表觀遺傳標(biāo)記。在人類癌細(xì)胞和組織中，m6A 修飾的下調(diào)s次被描述，與它們的正常對照相比。m6A 被發(fā)現(xiàn)是癌癥中調(diào)控最多的 DNA 修飾。除了在癌細(xì)胞中的調(diào)控外，與含有相當(dāng)?shù)土?nbsp;DNA m6A（< 0.001%）的原代細(xì)胞 / 組織相比，在體外培養(yǎng)的人類細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)了 m6A 修飾的百倍增加（0.03% - 0.22%）。因此，識別 DNA 上的 m6A DNA 甲基化水平和分布可以推進(jìn)對基因組水平上生物學(xué)過程表觀遺傳調(diào)控的理解，并為進(jìn)一步改善疾病診斷和治療提供有用的信息。

MethylFlash™ m6A DNA 甲基化 ELISA 試劑盒（比色法）是一套經(jīng)過優(yōu)化的緩沖液和試劑，用于比色法定量檢測 DNA 中的 N6 - 甲基腺苷（m6A 或 6mA）。該試劑盒適用于直接檢測從任何物種（如哺乳動物、植物、真菌、細(xì)菌和病毒）中分離的 DNA 的 m6A DNA 甲基化狀態(tài)。

艾美捷MethyFlash m6A DNA甲基化ELISA試劑盒（比色法）（#P-9010-48）優(yōu)勢與特點(diǎn)：

1、比色法檢測，操作步驟簡便，方便快捷。整個操作流程可在 3 小時 45 分鐘內(nèi)完成。

2、高靈敏度，檢測限可低至 5 pg 的 m6A。

3、特別的結(jié)合溶液可使長度大于 100 個核苷酸的 DNA 緊密結(jié)合到孔中，從而能夠?qū)ν暾?nbsp;DNA 或片段化 DNA（如 ChIPed DNA）中的 m6A 進(jìn)行定量。

4、優(yōu)化的抗體和增強(qiáng)溶液對 m6A 具有高特異性，在樣本 DNA 的指定濃度范圍內(nèi)，對未甲基化的腺苷無交叉反應(yīng)。

5、包含通用的正負(fù)對照，適用于定量任何物種的 m6A。

6、條帶式微孔板格式使檢測既適用于手動操作，也適用于高通量分析。

7、簡單、可靠且一致的檢測條件。

原理與操作流程：

該試劑盒包含用于定量檢測 DNA 中 m6A 的所有試劑。在該檢測中，使用 DNA 高結(jié)合溶液將 DNA 結(jié)合到條帶孔中。利用捕獲和檢測抗體檢測 m6A。增強(qiáng)檢測信號，然后通過在微孔板分光光度計(jì)中讀取吸光度來比色法定量。m6A 的含量與測得的 OD 強(qiáng)度成正比。

左圖：將不同濃度的 m6A 標(biāo)準(zhǔn)對照品加入到檢測孔中，然后使用 EpiQuik™ m6A DNA 甲基化 ELISA 試劑盒（比色法）進(jìn)行測量。

右圖：使用 MethylFlash™ m6A DNA 甲基化 ELISA 試劑盒（比色法）定量檢測各種人類 DNA 樣本中的 m6A 含量。