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技術(shù)文章

大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒操作及性能

閱讀:1588          發(fā)布時(shí)間:2019-5-15

大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1ELISA試劑盒操作及性能

 

本試劑盒用于體外定量檢測(cè)血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1TGF-β1)的含量。

有效期:6個(gè)月

保存條件:2-8℃

 

 

操作步驟

  1.   從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
  2.   設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
  3.   樣本孔待測(cè)樣本50μL;空白孔不加。
  4.   除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
  5.   棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
  6.   每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
  7.   每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測(cè)定各孔的OD值。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算

所測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為橫坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,并得到直線回歸方程,將樣品的OD值代入方程,計(jì)算出樣品濃度

試劑盒性能

  •  檢測(cè)范圍2.5 ng/mL  80 ng/mL。
  •  靈敏度:低檢測(cè)濃度小于0.1 ng/mL
  •  特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
  •  重復(fù)性:板內(nèi)變異系數(shù)小于10% ,板間變異系數(shù)小于15% 。

 

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