一、實(shí)驗(yàn)原理?

• ?染色機(jī)制?：通過陰離子染料分子量差異選擇性染色，小分子染料（如酸性品紅）滲透致密組織（肌纖維），大分子染料（如苯胺藍(lán)）結(jié)合疏松結(jié)構(gòu)（膠原纖維）
  。

• ?顯色特征?：膠原纖維呈藍(lán)色，肌纖維/細(xì)胞核呈紅色，紅細(xì)胞為橘紅色或黃色
  。

?二、關(guān)鍵試劑配制?

1. ?酸性品紅溶液?

• 0.5g染料 + 500ml蒸餾水（現(xiàn)配現(xiàn)用）
  

2. ?苯胺藍(lán)溶液?

• 2g染料 + 500ml蒸餾水（提前2天配制）
  

3. ?磷鉬酸溶液?

• 5g磷鉬酸 + 100ml蒸餾水（有效期≤3個月）
  

?三、操作步驟?

1. ?樣本預(yù)處理?

• 組織固定：10%福爾馬林固定24小時以上
  

• 石蠟包埋切片（4μm厚），常規(guī)脫蠟至水
  

2. ?染色流程?

• 酸性品紅染色5分鐘→蒸餾水沖洗
  

• 磷鉬酸處理10分鐘（分化背景）
  

• 苯胺藍(lán)復(fù)染3-5分鐘→96%乙醇分化（顯微鏡監(jiān)控）
  

3. ?封片觀察?

• 脫水透明后中性樹膠封固
  

?四、注意事項(xiàng)?

• ?分化控制?：乙醇分化需在顯微鏡下觀察，避免過度脫色導(dǎo)致信號丟失
  

• ?染色對比?：與Masson三色法相比，Mallory法對神經(jīng)膠質(zhì)纖維和軟骨染色更顯著
  

?五、應(yīng)用場景?

• ?病理診斷?：區(qū)分腫瘤組織中的膠原纖維與平滑肌成分
  

• ?科研分析?：評估組織纖維化程度（如肝硬化、腎臟病變）