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復(fù)雜蛋白質(zhì)樣品的高效分離是提高M(jìn)S對蛋白質(zhì)鑒定覆蓋度的重要因素。2D-Gel技術(shù)是依據(jù)蛋白質(zhì)等電點（iso-electric point）和分子量的差異，通過等電聚焦（IEF）和SDS-PAGE的二維分離，不同性質(zhì)的蛋白質(zhì)以點狀的形式（spot）分布在凝膠上；

樣品通過2D-Gel分離后，每個點上的蛋白質(zhì)復(fù)雜度急劇降低。因此，凝膠上的蛋白質(zhì)酶解后，不需要再進(jìn)行LC分離，可以直接進(jìn)行MALDI-TOF MS分析，從而縮短實驗周期和降低MS測試費用；

2D-Gel技術(shù)的蛋白質(zhì)樣品（細(xì)胞、組織、體液等）；

2D-Gel結(jié)合MALDI-TOF MS，主要用于差異蛋白質(zhì)組分析。

技術(shù)路線：

實驗流程：

1.蛋白質(zhì)提取及定量；

2.蛋白質(zhì)分別進(jìn)行2D-Gel電泳及染色；

3.掃描圖片，用軟件對圖像進(jìn)行分析，尋找差異點；

4.切割差異點，Trypsin酶解，提取肽段，MALDI-TOF MS完成蛋白質(zhì)鑒定；

5.數(shù)據(jù)篩選，挑選蛋白質(zhì)進(jìn)行驗證（Western blot等）。