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一、技術簡介

細胞黏附主要用于判定細胞在經(jīng)過各種藥物處理、基因轉染、敲除或培養(yǎng)條件改變后，細胞的黏附能力改變情況。通?？煞譃閮深?，即細胞與細胞黏附和細胞與基質黏附。細胞黏附性的改變在腫瘤轉移過程中也發(fā)揮著重要作用。惡性腫瘤具有從原發(fā)瘤分離及在體內(nèi)擴散的能力，提示這些細胞在相互識別及黏附機制方面發(fā)生了改變。

二、實驗流程

1. 用無血清培養(yǎng)基RPMI-1640將Matrigel（人工基底膜膠）配制成0.04μg/μl的人工基底膜膠備用，96孔板每孔中鋪Matrigel 2μg，放于超凈臺中風干過夜。

2. 在96孔板加入適量無血清RPMI-1640細胞培養(yǎng)液(或PBS或生理鹽水)，放置60-90分鐘。3. 洗去多余的膠，取培養(yǎng)的腫瘤細胞以1×104/孔接種在鋪膠的96孔板中，設3個重復孔，放入37攝氏度5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h。

4. 加藥和模型藥，培養(yǎng)48h。

5. MTT檢測：吸掉液體，然后每孔加入MTT 10μl，繼續(xù)培養(yǎng)4h，吸掉液體，每孔加入二甲基亞砜(DMSO)100μl，在振蕩器上振蕩5-10分鐘，在顯微鏡下觀察無晶體，然后在酶標儀490nm波長讀取數(shù)值。

三、服務說明及結果

1. 客戶提供：藥物。

2. 公司提供：基本實驗步驟、細胞粘附圖片、MTT檢測結果。

3. 實驗周期：10個工作日。