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當(dāng)前位置:> 供求商機> 細胞凋亡檢測服務(wù)
細胞凋亡(Cell Apoptosis)是指為維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定,由基因控制的細胞自主的有序的死亡。細胞凋亡與細胞壞死不同,細胞凋亡不是一件被動的過程,而是主動過程,它涉及一系列基因的激活、表達以及調(diào)控等的作用。
細胞凋亡檢測常用的方法為AnnexinV/PI雙染法流式檢測。其原理為:正常細胞中,磷脂酰絲氨酸(PS)只分布在細胞膜內(nèi)側(cè),但在細胞凋亡早期, PS從細胞膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè)至膜表面。Annexin V是一種分子量為35~36kD的Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白,可以與磷脂酰絲氨酸特異性結(jié)合,將Annexin V進行熒光素(FITC)標(biāo)記作為熒光探針,利用熒光顯微鏡或流式細胞儀可檢測細胞早期凋亡的發(fā)生。碘化丙啶(propidine iodide,PI)是一種核酸染料,它不能透過完整的細胞膜,無法進入活細胞內(nèi)部,但對凋亡中晚期的細胞和死細胞,PI 能夠透過細胞膜而使細胞核紅染。因此將Annexin V 與PI 匹配使用,就可以將凋亡早晚期的細胞以及死細胞區(qū)分開來。
細胞凋亡過程中染色體DNA發(fā)生斷裂,脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記法(TUNEL)利用脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶(tdt)的作用將斷裂缺口產(chǎn)生的DNA3'-oh與生物素相連接,使斷裂DNA染色,從而分析凋亡細胞。
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