Tissue Digestion Solution

? 配制后的正常可在2-8°C儲(chǔ)存，建議24小時(shí)內(nèi)使用，或-20℃儲(chǔ)存1個(gè)月

產(chǎn)品描述

?；镎＝M織消化液（Tissue Digestion Solution）可將正常組織樣本溫和、快速地消化解離為細(xì)胞懸液或細(xì)胞團(tuán)塊，可用于后續(xù)類器官的構(gòu)建。該廣泛適用于哺乳動(dòng)物的多種正常組織標(biāo)本（如腸、肝臟、肺臟、胃、胰腺等）在體外原代培養(yǎng)的消化解離。

產(chǎn)品信息

的配制

1、   4°無(wú)菌條件下配制正常，下面是配制10mL的示例，如果需要制備其他體積，可自行相應(yīng)調(diào)整。

2、   4℃解凍正常添加劑（20×），解凍后充分混勻；

注意：解凍后，建議將正常添加劑分裝后保存，按需取用，避免多次反復(fù)凍融；

3、   將500uL正常添加劑（20×）加至9.5mL基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，充分混合，配制成10mL。

注意：配制后的正常可在2-8°C儲(chǔ)存，建議24小時(shí)內(nèi)使用，或-20℃儲(chǔ)存1個(gè)月。

組織樣本的消化

1、   在消化之前利用或?qū)⑶谐审w積約為1~3mm3的碎片；

2、   根據(jù)原組織塊大小加入適當(dāng)體積的（消化液體積需是原組織體積的25-50倍）后置于37℃恒溫培養(yǎng)箱或37°C恒溫?fù)u床中進(jìn)行組織消化。不同種類組織的樣本，因其組織來(lái)源及個(gè)體化差異，其消化所需時(shí)間可能會(huì)有所不同，總體消化時(shí)間在30min-120min；

注意：在此操作過(guò)程中須仔細(xì)監(jiān)測(cè)消化過(guò)程，因?yàn)檫^(guò)度消化可能會(huì)顯著降低類器官形成效率。消化過(guò)程中，可以對(duì)消化懸液進(jìn)行鏡檢，在鏡下觀察到較多的單個(gè)細(xì)胞或70μm以下的細(xì)胞簇后，即可認(rèn)為消化完成；

3、   在確認(rèn)消化完成的組織懸液中加入胎牛血清（Fetal Bovine Serum,FBS）至終濃度達(dá)2-5%后吹打混合均勻以終止消化；

4、   上述步驟所獲得細(xì)胞懸液可直接用于離心或篩網(wǎng)過(guò)濾后進(jìn)行離心，獲取細(xì)胞團(tuán)塊，在使用分離的細(xì)胞前需利用類器官基礎(chǔ)培養(yǎng)基對(duì)樣本進(jìn)行兩次以上的離心清洗方可使用（推薦離心速度200-300g，離心3min）。

V2.0版

更新時(shí)間：2025/6/21