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大小鼠中綠膿桿菌的感染和檢測方法

時間:2025/6/14閱讀:114
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綠膿桿菌廣泛存在于自然界中,革蘭氏陰性桿菌常寄生于人和動物的體表、呼吸道、消化道,免疫力下降是重要的發(fā)病誘因,當機體免疫力低下時可引起全身性感染,在燒傷感染中綠膿桿菌檢出率較高,也有綠膿桿菌引起新生兒腹瀉爆發(fā)流行的案例。

對實驗動物而言SPF 小鼠及無菌小鼠被綠膿桿菌感染后,多數不表現癥狀,以潛伏感染為主,當宿主免疫系統受損,??梢鸶腥尽⒀装Y、敗血癥甚至死亡等。但進行醫(yī)藥、生物制品實驗時,常影響試驗結果,導致實驗的失敗,故綠膿桿菌已被列為無特定病原體小鼠必須排除的細菌之一。綠膿桿菌感染實驗動物,給育種繁殖工作帶來困難,綠膿桿菌對實驗動物的危害應引起足夠的重視。

綠膿桿菌是SPF級小鼠必檢項目, 主要定植于腸道內和糞便中。實驗動物的細菌可以在特定的部位定植, 可在不同的培養(yǎng)基中生長, 有不同的菌落形態(tài)。與生化試劑有特殊的生化反應80年代為迅速測出SPF 小鼠體內是否被綠膿桿菌感染,曾經用噬菌體裂解試驗

綠膿桿菌的檢測目前多采用病原學的檢測方法, 即通過分離培養(yǎng)、菌落形態(tài)特征和生化反應特征來確定動物體中是否感染病原菌這是目前較為可靠、直接的檢測方法。該方法在實驗動物細菌學檢測中應用廣泛, 也是主要的檢測方法。但是, 該方法具有操作不便、工作量大等缺點。

新國標GB14922-2022中指出,綠膿桿菌的檢測用GB14926的檢測方法進行檢測。國標GB14926中指出:“綠膿桿菌是革蘭陰性桿菌,具有產生綠色色素和氧化酶等生化試驗特征。因此,可利用選擇性培養(yǎng)基培養(yǎng)、菌體檢驗和生化試驗進行鑒定。"根據國標的內容,綠膿桿菌大部分菌落可產生綠色色素而致使培養(yǎng)基呈綠色。當被檢菌為革蘭陰性桿菌,氧化酶陽性及產生綠色色素,可報告檢出綠桿菌。有時也需要結合一些生化反應來確認綠膿桿菌的感染。

當前分子生物學的PCR檢測方法也是綠膿桿菌的重要檢測方式,這種檢測方法的優(yōu)點是檢測的靈敏度高,方便快捷,避免了菌株培養(yǎng)的繁瑣流程和時間。一般6小時之內可以出檢測結果。正是由于這種便捷性和靈敏度,越來越多實驗者使用PCR方式進行綠膿桿菌的檢測和陽性復檢確認。




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